[发明专利]一种半日花烷型二萜类化合物及其分离方法和应用

说明书

本发明属于植物化学技术领域，公开了一种半日花烷型二萜类化合物及其分离方法和应用。本发明从裸花紫珠叶子中提取分离出新骨架半日花烷型二萜类化合物A1和A2，两者为一对差向异构体，为首次发现此类碳骨架结构。药物活性实验表明本发明化合物具有明显的抗炎活性，说明其在制备预防或治疗炎症药物方面具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于植物化学技术领域，具体涉及一种半日花烷型二萜类化合物及其分离方法和应用。

背景技术

裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.)又名赶风柴、节节红，是马鞭草科(Verbenacase)紫珠属(Callicarpa)植物，为海南省道地药材，也是黎族地区常用药材之一。其地上部位均可入药，有消炎解毒，散瘀消肿，抗菌止血等功效，主治化脓性炎症、创伤性出血、消化道和呼吸道感染、烧烫伤等症。临床辅助用于皮肤科、妇科、五官科、外科等各类术后出血型疾病。现已被2015年版《中国药典》新增中药品种收录。

裸花紫珠的化学成分研究报道主要为黄酮(苷)类、苯丙素(苷)类、二萜、三萜、环烯醚萜类、酚酸类等多种类的化合物，且都具有较好的生物活性。部分半日花烷型二萜类化合物具有抗炎作用，但效果欠佳。裸花紫珠中含有大量具有生活活性的化合物，本发明旨在对裸花紫珠化学成分进一步分离研究，以期得到新结构的具有显著抗炎作用的半日花烷型二萜类化合物，充分发挥裸花紫珠的药用价值。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明提供一种新结构的高度修饰半日花烷型二萜类化合物，具有显著的抗炎作用，并提供目标化合物的分离方法。

本发明技术方案如下：

本发明提供一种高度修饰半日花烷型二萜类化合物，A环经过裂环、降碳、C2-C18环合而成，分别为化合物A1和A2，其结构分别为：

本发明还提供了化合物A1和A2的分离方法，包括以下步骤：

(1)将干燥裸花紫珠叶子粉碎，将裸花紫珠粉末使用乙醇溶液加热50～60℃提取，得到提取液，减压浓缩得粗提物；

(2)将粗提物用水稀释制成悬浮液后，用二氯甲烷萃取，合并有机相，减压浓缩得浸膏；

(3)取步骤(2)二氯甲烷萃取得到的浸膏，先经硅胶柱层析，采用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂作为洗脱剂进行梯度洗脱，洗脱梯度为(30:1)～(1:1)，根据极性大小共得到5个组分，即Fr.1～Fr.5；

(4)将Fr.3先经正相硅胶柱层析，采用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂作为洗脱剂进行梯度洗脱，洗脱梯度为(20:1)～(1:1)，减压浓缩后再经Sephadex LH-20凝胶柱层析，洗脱剂为MeOH，洗脱3～6个柱体积，减压浓缩后再经高效液相色谱HPLC制备，依次得到化合物A1和A2。

优选的，步骤(1)中，所述提取次数为2次以上，每次提取1～3h，合并提取液；步骤(2)中，用二氯甲烷萃取3次以上。

优选的，步骤(1)中，所述乙醇溶液的体积分数75～95％，其用量为每千克裸花紫珠粉末用2～3L乙醇溶液。

优选的，步骤(2)中，水的用量为每100克粗提物加水300～400mL，每次萃取的有机溶剂的体积用量是水体积的1.2-1.3倍。

优选的，步骤(3)中，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂的洗脱梯度为30:1、20:1、10:1、5:1、1:1，每个梯度收集三个柱体积，每个梯度得到一个组分，共得到5个组分，即Fr.1～Fr.5。