[发明专利]一种石蜡切片钙盐染色套染苏木素-伊红试剂盒及其染色方法

说明书

本发明公开了一种石蜡切片钙盐染色套染苏木素‑伊红试剂盒，该试剂盒包括由以下组分构成：二甲苯、无水乙醇、Von kossa银染液、海波溶液、苏木素染色液、伊红染色液、苏木素分化液、苏木素返蓝液；一种石蜡切片钙盐染色套染苏木素‑伊红试剂盒的染色方法，包括如下步骤构成，S1:脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min、二甲苯Ⅱ15min、无水乙醇Ⅰ5min、无水乙醇Ⅱ5min、85％酒精5min、75％酒精5min、蒸馏水洗，本发明的石蜡切片钙盐染色(Von kossa银法)套染苏木素‑伊红(HE)试剂盒及其染色方法通过技术优化将钙盐染色和HE染色相结合，应用于各种组织钙盐沉积和病变情况的判断，与单纯石蜡切片钙盐染色，HE染色相比，结果对比明显，染色清晰，易于判断。

技术领域

本发明涉及生物医药应用领域，尤其是涉及一种石蜡切片钙盐染色套染苏木素-伊红试剂盒及其染色方法。

背景技术

钙质是人体不可缺少的一大营养素，一旦缺乏，可能因为骨骼不坚固出现骨折等问题。临床上与之相似的一种病症被称为钙质沉着。钙质沉着症是不溶性钙盐沉积于组织所产生的疾病。分为特发性、转移性和营养不良性。特发性钙质沉着症多原因不明，转移性钙质沉着症继发于钙磷代谢障碍性疾病，如甲状旁腺功能亢进、多发性骨髓瘤、肾功能不全使磷酸盐潴留等。营养不良性钙质沉着症多继发于皮肤或组织损伤。现临床上大多慢性病会伴随血管钙质沉积。使用石蜡切片进行钙盐染色(Von kossa银法)检测钙质沉积是目前最简单，直接，有效的方法。苏木精-伊红(HE)染色是组织学、胚胎学、病理学和科研中最基本、使用最广泛的技术方法。是区分和辨别正常组织和病变组织最简单、快捷和直接的方法。由于临床上获取样本后，必须制作多张冰冻切片，石蜡切片等进行各种染色，已备观察结果。由于临床获得样本较少，且个体差异较大，对样本取材要求较高，若染色结果不理想，需要进行重复染色，造成样本量不足做更多染色检测。

为此，提出一种石蜡切片钙盐染色套染苏木素-伊红试剂盒及其染色方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种石蜡切片钙盐染色套染苏木素-伊红试剂盒及其染色方法，该试剂盒染色过程简单快捷，可以用于同一张切片上染色显示钙盐沉积及病变情况，本发明的石蜡切片钙盐染色(Von kossa银法)套染HE可减少组织制备过程，染色步骤少，实验时间短，稳定性高，实验结果对比明显，所呈现的结果信息远远高于传统单染，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种石蜡切片钙盐染色套染苏木素-伊红试剂盒，该试剂盒包括由以下组分构成：二甲苯、无水乙醇、Von kossa银染液、海波溶液、苏木素染色液、伊红染色液、苏木素分化液、苏木素返蓝液。

一种石蜡切片钙盐染色套染苏木素-伊红试剂盒的染色方法，包括如下步骤构成：

S1:脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min、二甲苯Ⅱ15min、无水乙醇Ⅰ5min、无水乙醇Ⅱ5min、85％酒精5min、75％酒精5min、蒸馏水洗；

S2:切片入Von Kossa银溶液，强光照射30min，蒸馏水洗1min；

S3:切片入海波溶液处理2min，蒸馏水洗1min；

S4:苏木素染色3-5min，流水稍冲洗；

S5:苏木素分化液分化30sec，观察分化效果，流水稍冲洗；

S6:苏木素返蓝液返蓝1min，流水稍冲洗；

S7:镜检着色满意后入伊红染色液染色3-5min；

S8:95％酒精Ⅰ5min、95％酒精Ⅱ5min、无水乙醇Ⅰ5min、无水乙醇Ⅱ5min、二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ，中性树胶封片。

优选的，所述S8中二甲苯Ⅰ5min、二甲苯Ⅱ10min。