[发明专利]一种小美旱杨无菌微型扦插快繁方法

说明书

本发明属于林业无性繁殖技术领域，具体涉及一种小美旱杨无菌微型扦插快繁方法，所述方法包括如下步骤：（1）以小美旱杨幼嫩茎段或茎尖为外植体，进行无菌消毒处理；（2）将经步骤（1）处理过的所述小美旱杨幼嫩茎段或茎尖切成带有至少一个腋芽的小美旱杨幼嫩茎段，接种于培养基中，萌发腋芽；（3）当步骤（2）中所述腋芽伸长至一定长度，切下接种于培养基中对所述腋芽进行增殖形成丛生芽；（4）将步骤（3）中的所述丛生芽伸长一定高度后，切割成单芽接种于培养基诱导培养获得无菌微型扦插苗。本发明的优点是：具有繁殖速度快，繁殖系数大的优点且不受季节和繁殖材料的限制，可在短时间内获得大量植株。

技术领域

本发明属于林业无性繁殖技术领域，具体涉及一种小美旱杨无菌微型扦插快繁方法。

背景技术

小美旱杨又称群众杨(Populuspopularis)，是由小叶杨为母本，钻天杨及旱柳的混合花粉(1:8)为父本进行杂交得到的杂种苗。它具有耐旱、抗腐烂、溃疡病、材质优良等特性，适应于华北及西北地区栽培。小美旱杨多采用无性繁殖，主要有扦插繁殖和嫁接繁殖，但存在扦插繁殖生根难、成活率低，嫁接繁殖受气候条件、管理措施等问题，不能满足大面积造林和城市绿化的需求。2005年，马丽等以小美旱杨叶片为外植体进行了再生体系的初步研究，获得了完整植株，但其成活率也得不到保证。

发明内容

本发明的目的是根据上述现有技术的不足，提供了一种小美旱杨无菌微型扦插快繁方法，采用小美旱杨的幼嫩茎段或茎尖作为外植体进行无性来繁殖，实际是微型扦插繁殖，它不通过诱导愈伤组织阶段而直接诱导成苗，实现了小美旱杨的快速繁殖。

本发明目的实现由以下技术方案完成：

一种小美旱杨无菌微型扦插快繁方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：

（1）以小美旱杨幼嫩茎段或茎尖为外植体，进行无菌消毒处理；

（2）将经步骤（1）处理过的所述小美旱杨幼嫩茎段或茎尖切成带有至少一个腋芽的小美旱杨幼嫩茎段，接种于培养基中，萌发腋芽；

（3）当步骤（2）中所述腋芽伸长至一定长度，切下接种于培养基中对所述腋芽进行增殖形成丛生芽；

（4）当步骤（3）中的所述丛生芽伸长至一定高度，在所述丛生芽上切割下单芽并将所述单芽接种于培养基诱导培养获得小美旱杨的无菌微型扦插苗。

所述步骤（2）中的培养基的组分为：1/2MS+6-BA 0.5mg/L、NAA0.03mg/L、蔗糖30g/L、琼脂6g/L。

所述步骤（3）中的培养基的组分为：1/2MS+6-BA 0.5mg/L、NAA0.2mg/L、GA30.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂6g/L。

所述步骤（4）中的培养基的组分为：1/2MS+IBA 0.3mg/L、NAA0.08mg/L、蔗糖30g/L、琼脂6g/L。

所述步骤（2）、所述步骤（3）以及所述步骤（4）中所用培养基pH控制在5.8-6.0；培养条件为：温度25±1℃、光照强度为2500Lx，光照时间12h/d。

所述腋芽伸长至2-3cm后切下接种。

所述丛生芽的高度为3cm时，切割单芽接种于所述培养基中。

本发明的优点是：具有繁殖速度快，繁殖系数大的优点且不受季节和繁殖材料的限制，可在短时间内获得大量植株；能够在人工控制环境下大量繁殖小美旱杨；即省略了复杂的培养程序，又缩短了培养周期，这对于优良树种和具有特殊遗传型单株的繁殖与保存具有重要意义，通过微扦插方法建立小美旱杨植株再生体系，为其生物学研究和遗传改良及转化工作奠定了基础。

具体实施方式