[发明专利]一种水溶性甲醛荧光探针的制备方法

说明书

本发明专利公开了一种水溶性甲醛荧光探针的制备方法。属于化学分析检测领域。其分子结构式如式I所示该荧光探针水溶性好、选择性强、抗干扰能力强和灵敏度高，可直接用于食品和癌细胞甲醛的快速检测，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种水溶性甲醛荧光探针的制备方法，属于化学与生物分析检测成像技术领域。

背景技术

甲醛(化学式HCHO，FA)是一种反应性羰基物质(RCS)，也称为蚂蚁醛，是一种无色气体，溶于有机溶剂，有刺激性气味，对人的眼睛，鼻子等有刺激作用，具有还原性能强，经常非法用于食品加工和保鲜。此外，根据相关研究，一方面，35％～40％的FA水溶液被非法用作食品防腐剂，通常用于蔬菜，水果，肉类和海鲜中；另一方面，FA是国际公认的致癌物。此外，由于FA不正确地添加到食品中，这将导致FA残留在食品中。一旦人体摄入大量含有过量FA的食物，就会在人体中异常蓄积并引起多种疾病，包括哮喘，慢性肝病，心脏病，老年痴呆症和癌症。因此，开发一种简便，快速的食品领域和生物系统中FA检测方法具有重要意义。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种合成简单，反应条件温和，成本较低的荧光探针；目的之二合成一种高灵敏度，高选择性，能实现用荧光法快速便捷的检测食品中的甲醛。

本发明使用荧光法检测食品中的甲醛，以具有水溶性的羧基与萘酰亚胺设计探针，肼为甲醛的识别基团。

本发明解决问题采取的技术方案为，一种荧光法检测甲醛的水溶性荧光探针，其分子结构式为式I所示，该荧光探针的合成路线如图1所示。

(1)具体制备方法包含下面两个步骤：将4-溴-1，8-萘酐和甘氨酸加入反应器中，加入适量的乙醇做溶媒，在室温下搅拌反应，用薄层色谱法跟踪反应，直到4-溴-1，8-萘酐完全消失为止，把反应体系冷却到室温后倒入冰水中，待固体析出后，抽滤并用冷水洗涤3次，得到的白色固体用恒温干燥箱干燥，无需进一步纯化直接用于下一步；(2)将上一步所得的粗产物，水合肼加入反应瓶中，加热回流，用薄层色谱法跟踪反应，直到上步的所得到的原料完全消失为止。把反应体系冷却到室温后倒入冰水中，待固体析出后，抽滤并用冷水洗涤3次，得到的黄色固体用恒温干燥箱干燥，无需进一步纯化。在本说明书的实施例中更详细的说明了探针的合成和检测方法。

本发明的荧光探针使用方法如下，将探针分子溶解在pH7.4的PBS缓冲溶剂中，在室温下进行测试。当加入甲醛时，肼基团可以快速的与甲醛发生化学反应，使荧光信号增强，探针与甲醛的响应机理如下：

本发明的荧光探针的具体特征如下，探针本身无明显的荧光发射信号，但是与甲醛作用后，探针分子在525nm处有明显的荧光增强信号，荧光强度增强了60倍。

本发明所述的探针分子具有合成简单，合成成本低，对甲醛具有高灵敏度，高选择性，且能实现用荧光法快速便捷的检测食品中的甲醛。

附图说明

附图1为可溶性甲醛荧光探针的合成路线。

附图2为可溶性甲醛荧光探针与H2S的响应机理图示。

附图3为(a)图二探针分子(1μM)对甲醛的响应的荧光谱图，甲醛(0-20μM)；(b)和(c)加甲醛前后的荧光图片。

附图4：(a)选择性实验,1微摩尔探针分子加入15微摩尔甲醛或者100微摩尔其它分析物。数字1到16分别是空白(探针分子)，S2O32-,S2O42-,S2O52-,SO3-,GSH,Cys,Hcy,Na2S,Ca2+,Mg2+,Na+,K+,Cu2+,Zn2+,和Fe3+；(b)pH(4-9)对探针分子在加入硫化氢前后的影响；(b)pH值对探针检测甲醛的影响。

附图5为：食品中甲醛的检测视图。

具体实施方式