[发明专利]一种利用鲟鱼软骨提取硫酸软骨素的方法

说明书

本发明提供一种利用鲟鱼软骨提取硫酸软骨素的方法，属于生物技术领域，包括利用没食子酸和迷迭香酸对鲟鱼软骨进行预处理工序得到脱蛋白脱脂软骨；利用稀碱酶解对脱蛋白脱脂软骨进行提取工序得到硫酸软骨素粗液；利用浓碱对硫酸软骨素粗液进行降解工序得到降解液，以及，利用乙醇溶液对降解液进行分离纯化工序得到硫酸软骨素。本发明通过对鲟鱼软骨的预处理，提高了在酶解步骤对硫酸软骨素的提取率，通过微波辅助的降解工序，得到了小分子硫酸软骨素。本发明实现了以鲟鱼软骨为原料，提取具有高经济价值的硫酸软骨素，实现了对鲟鱼加式副产物的充分利用，变废为宝。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用鲟鱼软骨提取硫酸软骨素的方法。

背景技术

硫酸软骨素(chondroitin sulfate)是一种来源于动物骨骼组织的重要酸性粘多糖——糖胺聚糖，以由β-1，4-糖苷键连接的D-氨基葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-氨基半乳糖构成的双糖作为基本结构单位，再由约50～70个基本二糖通过硫酸基团与N-乙酰-D-氨基半乳糖碳四位或六位上氢氧基的聚合反应，构成多糖大分子，其分子式为(C₁₄H₂₁NO₁₄S)_n，分子量约为10000～50000，由于分子构型及与羧基、硫酸基团结合部位的不同，存在着多种同分异构体。硫酸软骨素主要存在于动物的软骨组织中，经常与蛋白质中的丝氨酸羟基结合并以糖蛋白的形式存在，是机体组织的自然成分。

近年来，鲟鱼的养殖规模不断扩大，鲟鱼软骨是鲟鱼产品的主要副产物之一，而鲟鱼的头、脊索、鳍中软骨占鱼体的10％左右，但作为鱼类加工的副产物却通常作为废弃物被丢弃，既浪费资源又污染环境。硫酸软骨素的提取方法主要有碱法、中性盐法、酸法、超声辅助法以及发酵法，碱法可以从动物软骨中将硫酸软骨素完整的提取出来，出成率高、操作简单，但是一些可溶性蛋白质溶解在碱性溶液中，不易去除；盐法多因提取出成率低不被采用；超声波提取法操作时间要求高，操作时间太长则会离解出大量杂质，影响产品的质量。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用鲟鱼软骨提取硫酸软骨素的方法，该方法利用没食子酸和迷迭香酸对鲟鱼软骨进行预处理，使硫酸软骨素从软骨提取到溶液中，提高硫酸软骨素的提取效率。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种利用鲟鱼软骨提取硫酸软骨素的方法，包括：

利用没食子酸和迷迭香酸对鲟鱼软骨进行预处理工序；

利用稀碱酶解对预处理后软骨进行提取工序得到硫酸软骨素粗液；

利用浓碱对硫酸软骨素粗液进行降解工序得到降解液；以及，

利用乙醇溶液对降解液进行分离纯化工序得到硫酸软骨素。

鲟鱼软骨中含有蛋白质、胶原纤维、弹性纤维，影响硫酸软骨素的提取，硫酸软骨素在其中与它们结合在一起，本发明利用没食子酸与迷迭香酸对鲟鱼软骨的预处理，没食子酸与迷迭香酸具有羟基和羧基，使软骨中钙溶解到溶液中，使软骨结构松散，并减弱蛋白质、胶原纤维、弹性纤维及硫酸软骨素之间的作用力，提高了在酶解步骤对硫酸软骨素的提取率，同时通过降解工序得到了小分子硫酸软骨素。本发明实现了以鲟鱼软骨为原料，提取具有高经济价值的硫酸软骨素，实现了对鲟鱼加式副产物的充分利用，变废为宝。