[发明专利]一种能够抑制趋化性细胞因子受体CCR5启动子活性的药物

说明书

本发明涉及生物医药工程技术领域，具体为一种能够抑制趋化性细胞因子受体CCR5启动子活性的药物，本发明提供了姜黄素在抑制CCR5启动子活性中的应用，同时姜黄素还具有抗HIV活性，能够抑制HIV复制，具有抗HIV‑1和HIV‑2活性；同时，姜黄素也是HIV整合酶和蛋白酶的抑制剂。因此，姜黄素的分子结构可以做为抗HIV新药设计的结构基础，具有开发潜力；另一方面，提供了筛选抑制CCR5启动子活性的药物筛选系统；本发明构建了双荧光素酶报告基因技术，以萤火虫荧光素酶作为报告基因，用于反映CCR5启动子的活性；在方便研究人员观察的同时也极大提高了研究的精确度。

技术领域

本发明涉及生物医药工程技术领域，具体为一种能够抑制趋化性细胞因子受体CCR5启动子活性的药物。

背景技术

获得性免疫缺陷综合症(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的传染性疾病。HIV-1进入靶细胞与CD4结合后，gp120通过构象变化从而暴露其辅助受体CCR5的结合位点。形成CD4-gp120-CCR5三分子复合物，导致病毒和靶细胞之间的膜融合，允许病毒RNA基因组进入靶细胞。作为G蛋白偶联因子超家族成员的细胞膜蛋白CCR5是参与HIV感染人体感染的主要辅助受体。因此，可以通过干预CCR5的启动子,影响CCR5基因的表达来预防和治疗HIV感染。

姜黄素是从传统中药姜黄根茎中提取的活性成分，具有强大的抗肿瘤、抗炎、抗氧化的功能。近年研究发现，姜黄素还具有抗HIV活性，能够抑制HIV复制，具有抗HIV-1和HIV-2活性。同时，姜黄素也是HIV整合酶和蛋白酶的抑制剂。因此，姜黄素的分子结构可以做为抗HIV新药设计的结构基础，具有开发潜力。利用构建的药物筛选系统pGL4.10-RLUC，筛选出中药单体姜黄素能够显著抑制CCR5启动子活性。

由鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一个目的在于通过姜黄素来抑制CCR5启动子活性，同时姜黄素抗HIV活性，能够抑制HIV复制，来预防和治疗HIV感染。

本发明的另一目的是提供了筛选抑制CCR5启动子活性的药物筛选系统。本发明构建了双荧光素酶报告基因技术，以萤火虫荧光素酶作为报告基因，用于反映CCR5启动子的活性。

本发明提供了姜黄素在抑制HIV感染和治疗中的应用。

一种能够抑制趋化性细胞因子受体CCR5启动子活性的药物，所述药物的主要成分为姜黄素。

进一步地：所述姜黄素化学分子式为：

进一步地：所述姜黄素来源于Sigma-Aldrich公司,货号与规格:00500590-10mg,HPLC≥97％。

进一步地：所述姜黄素需要用无水乙醇配制成10μmol/L的母液。

进一步地：所述姜黄素作用的载体为pGL4.10-RLUC，姜黄素作用于已转染pGL4.10-RLUC的293T细胞。

进一步地：所述CCR5启动子基因片段和Rluc插入含有Firely荧光素酶报告基因的PGL4.10表达载体上，形成重组质粒pGL4.10-Rluc-CCR5。

进一步地：所述pGL4.10-Rluc-CCR5可通过双荧光酶观察出CCR5启动子活性。

进一步地：所述pGL4.10-Rluc-CCR5可通过双荧光酶观察出CCR5启动子活性。

进一步地：所述姜黄素通过影响CCR5启动子活性来影响CD4-gp120-CCR5三分子复合物来实现干预HIV感染。

与现有技术相比，本发明的增益效果是：