[发明专利]一种加强胞内丙酰辅酶A代谢提高甾药前体生产的方法有效
| 申请号： | 202010630852.4 | 申请日： | 2020-07-03 |
| 公开（公告）号： | CN111690586B | 公开（公告）日： | 2023-06-20 |
| 发明（设计）人： | 申雁冰;王敏;周秀玲;张扬;张晓;夏梦雷;骆健美 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/52;C12N15/61;C12P33/00;C12R1/32 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 栗华楠 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 加强 胞内丙酰 辅酶 代谢 提高 甾药前体 生产 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种甾药前体生产菌，其特征在于，是通过在分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum)MNRM3中表达PCCB编码基因的同时，敲除表达PCCD的基因来构建的；
表达PCCB的基因为pccB，核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:3所示；表达PCCD的基因为pccD，核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:13所示。
2.如权利要求1所述的一种甾药前体生产菌，其特征在于，基因表达采用的表达载体为质粒pMV261。
3.如权利要求1所述的一种甾药前体生产菌，其特征在于，利用敲除载体对PCCD编码基因进行敲除。
4.权利要求1-3任意一项所述甾药前体生产菌在生产甾药前体中的应用。
5.权利要求4所述的应用，其特征在于，在生产雄甾-4-烯-3,17-二酮中的应用具体如下：
将甾药前体生产菌种子培养液以2-10％的接种量转接于发酵培养基中，在25-35℃，50-200rpm条件下培养24-168h；
发酵培养基组成：K2HPO4 0.1-3g/L，MgSO4 0.1-3g/L，柠檬酸铁铵0.01-0.2g/L，柠檬酸1-5g/L，磷酸氢二铵1-10g/L，葡萄糖5-50g/L，植物甾醇1-50g/L，其余为水，pH 6.0-7.5。
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