[发明专利]一种水曲柳悬浮细胞诱变方法在审
| 申请号： | 202010637504.X | 申请日： | 2020-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN113430192A | 公开（公告）日： | 2021-09-24 |
| 发明（设计）人： | 曾凡锁;齐凤慧;岳国华;田红梅;郭樱杰;肖英;刘华领;詹亚光 | 申请（专利权）人： | 东北林业大学 |
| 主分类号： | C12N15/01 | 分类号： | C12N15/01;C12N5/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 150040 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 水曲柳 悬浮 细胞 诱变 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种水曲柳悬浮细胞诱变的方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)水曲柳悬浮细胞的培养：将水曲柳松散的愈伤组织接种到WPM+0.56g/L Ca(NO3)2+20g/L蔗糖+6.5g/L琼脂+1mg/L 6-BA+4mg/L TDZ培养基中，15-20d继代一次，继代培养基为：WPM+0.56g/L Ca(NO3)2+20g/L蔗糖+6.5g/L琼脂+2mg/L 6-BA+4mg/L TDZ，两种培养基pH均为6.5；
(2)水曲柳悬浮细胞的诱变：在(1)的培养基中添加0.05-0.3％EMS或5-30μmol/Lzebularine进行细胞诱变，培养条件120rpm/min摇床上光照培养14～16d；
(3)诱变效果评价和抗逆细胞筛选：采用含100mmol/L氯化钠、75mmol/L甘露醇或40μmol/L氯化镉的WPM液体培养基悬浮培养细胞，120rpm/min摇床上光照培养14～16d，检测悬浮小细胞团的抗逆水平，实现对诱变效果进行评价和筛选抗逆细胞系。
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