[发明专利]一种抗肿瘤生物多糖的制备方法

说明书

本发明公开了一种抗肿瘤生物多糖的制备方法，属于生物技术领域，本发明由于硫酸化改改性过程中采用了酒石酸钠和2‑苯基苯并咪唑‑5‑磺酸，得到的硫酸化香菇多糖的取代度高，达到了0.4以上，硫酸化香菇多糖的还原力好，达到了0.8以上；其中，硫酸化改性的步骤为：将硫酸铵加入正丁醇中得到硫酸铵正丁醇溶液，加入硫酸溶液，加入香菇多糖粉末，加入助剂酒石酸钠和2‑苯基苯并咪唑‑5‑磺酸，在零下5至5℃的温度下反应0.5‑5h，调pH至6‑8，蒸馏水透析12‑48h，浓缩、醇沉、离心、分离、复溶冻干得硫酸化香菇多糖。本发明是一种硫酸取代度高、还原力好的抗肿瘤生物多糖的制备方法。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗肿瘤生物多糖的制备方法。

背景技术

香菇是由营养器官菌丝体和繁殖器官子实体组成的，菌丝体主要起着吸收和积累营养成分的作用，就像植物的根、茎、叶的作用一样；而子实体可以繁殖下一代，就像植物的种子或者植物的果实。香菇不仅有丰富的营养，而且有很多保健和药用价值。1969年首次发现并用热水提取了香菇多糖，后来对香菇多糖不断的深入研究。香菇多糖因其安全性高、活性强、生产量高等原因被广泛利用。临床医学研究表明其药理作用是通过刺激巨噬细胞、T淋巴细胞等免疫细胞的增值、分化，从而提高人体的免疫力来达到抗肿瘤、抗病毒等目的。

研究发现多糖的结构决定了多糖的活性，通过硫酸化等修饰手段可以提高多糖的生物活性，并带来一些新的功能。1988年，日本学者率先得到硫酸化多糖，并通过细胞实验发现其对T-淋巴细胞具有较强的抑制作用。之后研究发现虽然香菇多糖本身并不具有抗艾滋病活性，但硫酸化后的香菇多糖具有较强的艾滋病毒抑制效果，这说明硫酸基团对于艾滋病毒生长过程的抑制作用明显。硫酸化修饰后的多糖处理拥有了抗病毒活性之外，也可以提高多糖的体外抗氧化活性，还可以获得一些其它的生物学功能，例如灰树花多糖的羧甲基化提高了其水溶性，增强了其免疫能力。

目前，研究表明，香菇多糖的分子量在4×10⁵-6×10⁵Da时抗氧化活性最强，并且修饰改性可以提高香菇多糖的抗肿瘤活性，保持多糖结构有好的抗肿瘤活性，所以如何制得小分子量香菇多糖及修饰改性小分子量香菇多糖仍具有十分重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种硫酸取代度高、还原力好的抗肿瘤生物多糖的制备方法。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种抗肿瘤生物多糖的制备方法，包括：通过香菇粉末提取、Sevage法除蛋白后制备得到香菇多糖粉末，通过含有香菇多糖、硫酸溶液、包含酒石酸钠的助剂的溶液改性制备得到硫酸化香菇多糖。其中，香菇多糖制备：香菇粉碎过40目筛得到香菇粉末，将香菇粉末加入去离子水中，在0.1-0.3MPa的压力和100-130℃的温度下提取0.5-6h，抽滤，将滤液减压浓缩至原体积的10-40％，加入2-5倍的80-95％的乙醇进行醇沉，离心、分离、干燥、复溶后Sevage法除蛋白，冷冻干燥得到香菇多糖粉末。

优选地，香菇粉末的添加量为1-10wt％，例如，2、3、5、7、9wt％。