[发明专利]一种外泌体的提取试剂及其应用有效
| 申请号： | 202010642250.0 | 申请日： | 2020-07-06 |
| 公开（公告）号： | CN111961636B | 公开（公告）日： | 2021-11-26 |
| 发明（设计）人： | 孙益军;韩斌;王雪根;张峰;李阳;孔科 | 申请（专利权）人： | 江苏凯基生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/00 | 分类号： | C12N5/00 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 210008 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 外泌体 提取 试剂 及其 应用 | ||
1.一种外泌体提取试剂，其特征在于，所述试剂包括10-200 mM的PEG4000、10-50 mM的β-环糊精、10-50 mM的咪唑、10-50 mM的硫酸铜及10-50 mM的HEPES。
2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述试剂包括100-200 mM的PEG4000、20-50 mM的β-环糊精、10-20mM的咪唑、20-50 mM的硫酸铜及20-50 mM的HEPES。
3.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述试剂包括100 mM的PEG4000、40 mM的β-环糊精、10 mM的咪唑、20 mM的硫酸铜及20 mM的HEPES。
4.权利要求1所述的试剂在分离细胞培养液外泌体中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：
（1）先将细胞培养液离心，取上清液；
（2）再将权利要求1所述的试剂与步骤（1）得到的上清液混合均匀，静置过夜；次日，再次离心，弃上清，所得沉淀即为高纯度的外泌体。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤（1）中，离心条件为在4℃，3000 -5000g条件下离心10-20 min。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤（2）中，试剂：上清液体积比为1：1~1：10。
8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤（2）中，离心条件为4℃，5000-10000 g条件下离心30-60 min。
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