[发明专利]高效秸秆纤维素分解菌的筛选及应用在审
申请号: | 202010643967.7 | 申请日: | 2020-07-07 |
公开(公告)号: | CN111690539A | 公开(公告)日: | 2020-09-22 |
发明(设计)人: | 王希春;冉梦;冯士彬;杨长根;李玉;汤继顺;吴金节 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学;望江县小月山农业发展有限公司 |
主分类号: | C12N1/02 | 分类号: | C12N1/02;C12N1/20;C12Q1/04;C12Q1/34;C12Q1/54;A23K10/12;A23K50/10;C12R1/01 |
代理公司: | 上海怡恩专利代理事务所(普通合伙) 31336 | 代理人: | 潘青青 |
地址: | 246260 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高效 秸秆 纤维素 分解 筛选 应用 | ||
1.高效秸秆纤维素分解菌的筛选,其特征在于,包括
步骤S1:采用羧甲基纤维素钠平板法初筛纤维分解菌,通过刚果红染色法和滤纸分解速率初步测定菌株分解纤维素的能力;
步骤S2:通过对初筛菌株进行滤纸酶活和羧甲基纤维素酶活的测定来继续判定降解纤维素的能力;
步骤S3:对纤维素分解菌进行鉴定并优化高产纤维素酶菌株的产酶条件。
2.如权利要求1所述的高效秸秆纤维素分解菌的筛选,其特征在于,所述步骤S3中具体包括:对筛选的纤维素分解菌进行形态学、不同温度和不同pH条件下生长特性以及16SrDNA鉴定,以确定菌株的阴阳性及种属;以及通过对筛选具有高产纤维素酶的菌株优化培养温度及初始pH,观察其产酶能力。
3.如权利要求2所述的高效秸秆纤维素分解菌的筛选,其特征在于,所述步骤S1具体包括:从屠宰后的牛瘤胃中采取新鲜的瘤胃液接入已灭菌预热的保温瓶中;对采集的瘤胃液进行处理得到单菌落并进行接种,然后进行初步的分解率测定。
4.如权利要求3所述的高效秸秆纤维素分解菌的筛选,其特征在于,所述步骤S2中具体包括:采用DNS比色法测定FPA酶活,以及采用DNS比色法对CMC酶活进行测定来继续判定降解纤维素的能力。
5.如权利要求1所述的高效秸秆纤维素分解菌的筛选,其特征在于,所述步骤S3中对纤维素分解菌进行鉴定包括:形态学鉴定;生长特性鉴定;分子生物学鉴定。
6.如权利要求5所述的高效秸秆纤维素分解菌的筛选,其特征在于,所述步骤S3中优化高产纤维素酶菌株的产酶条件包括:不同pH对菌株纤维素分解酶活力的影响;不同温度对菌株纤维素分解酶活力的影响。
7.高效秸秆纤维素分解菌的应用,其特征在于,利用筛选的高产纤维素分解菌,以优化的培养温度及初始pH对玉米秸秆发酵,测定发酵后玉米秸秆还原糖和可溶性蛋白成分的变化,以验证其应用性。
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