[发明专利]一种短密青霉菌及其用途

说明书

本发明公开了一种霉菌及其用途，涉及微生物技术领域。本发明的菌株命名为W‑B23,所述霉菌菌株为具有纤维素降解能力的短密青霉(Penicillium brevicompactum)。其形态特征：在PDA培养基上培养，菌落形状近圆形，深绿色，外围为白色，表面绒毛状，产孢结构大量形成，菌落背面青黑色，无水溶性色素。本发明能高效降解纤维素。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一种短密青霉菌，同时涉及该短密 青霉菌在降解纤维素中的用途。

背景技术

纤维素是世界上最丰富也是最重要的可再生资源，利用微生物生产的纤维 素酶将纤维素降解为单糖，再转化为能源、食物和化工原料等，均可以为人类 解决环境污染和资源短缺等问题。

自然界中各种各样的生物都能生产纤维素酶，微生物包括细菌、霉菌和放 线菌等，还有植物和动物来源。

相比于其它产纤维素酶的微生物，霉菌具有以下优点：一、产生的纤维素 酶为胞外酶，便于分离和提取；二、产酶效率高，且生产的纤维素酶酶系结构 较为合理。从工业化制备及应用纤维素酶的角度出发，研究和采用霉菌产酶具 有重大意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的霉菌，其属于短密青霉菌属。

本发明的一种短密青霉菌，其形态特征：在PDA培养基上培养，菌落形状 近圆形，深绿色，外围为白色，表面绒毛状，产孢结构大量形成，菌落背面青 黑色，无水溶性色素。

该菌种已于2020年6月4日保藏到中国微生物菌种保藏管理委员会普通微 生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所)， 保藏号：CGMCC NO：19908，名称：短密青霉(Penicillium brevicompactum) W-B23。

本发明的一种短密青霉(Penicillium brevicompactum)W-B23的分离，包 括以下步骤：

(一)对短密青霉的分离：

称取霉变果屑样品5g，置于盛有90mL无菌生理盐水且含玻璃珠的三角瓶 中，28℃，180r/min震荡60min。取上清作为10^-1，依次稀释至10^-2，10^-3，10^-4， 10^-5。吸取100μL稀释好的菌液涂布初筛培养基平板。将涂布好的平板置于28℃ 恒温培养箱中培养4-5d。用接种环挑取分离出的单菌落在PDA培养基平板上 涂布纯化，并置于28℃下培养至长出单菌落。挑取单菌落点种在PDA培养基斜 面上，28℃下培养，4℃保存。将保种菌株平板涂布活化后，挑取单菌落在产酶 筛选培养基平板上点种，分离温度下培养3-5d。培养结束后在平板上滴加1-2mL 1mg/ml的刚果红染液染色30min(尽量避免滴加到菌落上)，用1mol/L的NaCl 溶液脱色30min后，测量菌落直径(d)与水解圈直径(D)，并计算D/d的比值， 以此判断所分离菌株对纤维素的分解能力。选出D/d比值较高的菌株，进行编 号。

(二)培养基：

初筛培养基：马铃薯(去皮)200g，葡萄糖20g，琼脂20g，去离 子水1000mL，自然pH。

产纤维素酶筛选培养基：CMC-Na(羧甲基纤维素钠)6g，蛋白胨0.75 g，Na₂HPO₄0.75g，KH₂PO₄ 0.45g，琼脂6g，去离子水300mL，自 然pH。

产纤维素酶发酵液：液体产酶培养基：CMC-Na 10g，蛋白胨3.0g，酵 母膏0.2g，KH₂PO₄4.0 g，MgSO₄·7H₂O 0.3g，去离子水1000mL。