[发明专利]一种用于血清中维生素B12含量检测的释放剂、制备及应用

说明书

本发明提供了一种用于血清中维生素B12含量检测的释放剂、制备及应用；其能解决现有产品释放不完全、重复性差的技术问题。一种用于血清中维生素B12含量检测的释放剂，其特征在于，包括稳定剂、变性剂、中和剂；稳定剂为含有0.27%2‑氯乙酰胺、0.25%%二水乙二胺四乙酸二钠的水溶液；变性剂为含有4.78%氢氧化钠、2.94%硼酸、0.005%氰化钾的水溶液；中和剂为含有13.61%磷酸二氢钾水溶液。本发明的维生素B12释放剂释放完全、重复性好，并能够达到国际一线品牌的水平。

技术领域

本发明属于医疗器械生物类免疫体外诊断领域，具体涉及一种用于血清中维生素B12含量检测的释放剂、制备及应用。

背景技术

维生素B12是一种含有3价钴的多环系化合物，4个还原的吡咯环连在一起形成1个钴啉大环，是维生素B12分子的核心，分子量为1355。

人体吸收维生素B12的过程约需3小时，并且需要借助一种胃肠道分泌物（内因子），如人体缺乏该内因子，即使膳食中来源充足仍然会导致缺乏。人体缺乏维生素B12时易造成神经系统不可逆损害，引起烦躁不安、记忆衰退等症状，而且也会导致恶性贫血、老年痴呆及精神抑郁等疾病。并且过量的摄入可能会出现哮喘、荨麻疹、湿疹、面部浮肿、寒颤等过敏反应，也可能引发神经兴奋、心前区痛和心悸；也有报道认为过量可能会促进肿瘤发生。因此临床上建议对该类维生素做到先检测再补充，不缺乏不补充。

在人的血清或血浆中，维生素B12通常与内因子结合以复合物的形式存在。因此在检测前也需对样本进行预处理，以保证其以游离的形式存在。同时，维生素B12在体内有多个异构体形式，不同形式的分子与内因子的结合力有一定的差异，这种情况可能会导致检测结果不准确。向释放液中加入一定量的氰化钾可将样本中的羟钴胺素转化至氰钴胺素，以降低异构体之间的结合力差异导致的检测结果不准确的情况。本发明旨在阐述一种高效、简单、快速的血清中维生素B12释放剂，并应用于相应的免疫检测方法中。

发明内容

针对上述问题，本发明提供了一种用于血清中维生素B12含量检测的释放剂、制备及应用；其能解决现有产品释放不完全、重复性差的技术问题。

一种用于血清中维生素B12含量检测的释放剂，其特征在于，包括稳定剂、变性剂、中和剂；

所述稳定剂为含有0.27% 2-氯乙酰胺、0.25%%二水乙二胺四乙酸二钠的水溶液；

所述变性剂为含有4.78% 氢氧化钠、2.94%硼酸、0.005%氰化钾的水溶液；

所述中和剂为含有13.61% 磷酸二氢钾水溶液。

上述释放剂的制备方法，其特征在于：所述稳定剂、所述变性剂、所述中和剂分别按量称取原料后、混匀。

上述释放剂在血清中维生素B12含量检测中的应用，包括以下步骤：

（1）将30μL的样本、27μL的稳定剂和63μL的变性剂先后加入至样本处理管中，混匀并反应，得到第一溶液；

（2）向所述第一溶液中加入90μL中和剂混匀并反应。

进一步的，步骤（1）中所述反应的条件为37℃下反应10分钟；

步骤（2）中所述反应的条件为37℃下反应1分钟。

本发明的维生素B12释放剂释放完全、重复性好、简单快速，采用该方法可较大程度改善现有产品释放不完全、重复性差、操作复杂、耗时长等诸多缺点。

附图说明

图1为本发明的释放剂与贝克曼公司试剂盒检测结果线性回归图。

图2为本发明的释放剂与贝克曼公司试剂盒检测结果的相对偏差图。

具体实施方式