[发明专利]一种适用于核酸检测的病毒运送培养基及其制备方法

说明书

本发明提供了一种适用于核酸检测的病毒运送培养基及其制备方法，所述病毒运送培养基为包含以下浓度组分的水溶液：Na₂HPO₄·12H₂O 67～68g/L，KH₂PO₄1.6～1.7g/L，Na₂EDTA·2H₂O 0.8～1.2mM，NaN₃0.8～1.5g/L。本发明通过配方的优化使得所述病毒运送培养基具有病毒核酸保存效果好、防腐杀菌性能优良、杀菌范围广、价格低廉和成分明确等优点，可以在4℃条件下长时间保持病毒基因组的完整性，完全能够满足日益增长的临床病毒核酸检测需求。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种适用于核酸检测的病毒运送培养基及其制备方法。

背景技术

病毒是由核酸分子(DNA或RNA)和蛋白质外壳构成(部分病毒还有脂质和糖蛋白构成的包膜)的非细胞型生物，个体微小，具有严格的寄生性，必须在活细胞内才能进行复制增殖。

很多常见病毒(如腺病毒、呼吸道合胞病毒、肠道病毒等)可以引起多种临床症状，一些不同的病毒又可引起相同的临床表现，通常很难单纯从临床症状进行区分，因此实验室的病原学诊断对于病毒的最终确诊极为重要。目前，随着分子生物技术的飞速发展，病毒核酸检测方法日新月异，由于其简便快速、高通量、高敏感度以及高特异性的优势，成为了病毒感染临床诊断的主要方法。其中实时荧光定量PCR因其技术成熟、操作简单、通量高等特点成为目前实验室核酸检测的首选平台。为确保病原微生物检验结果准确，除了标本的正确选择和采集外，样本的适当保存及运输等检验前阶段对于病原微生物检验的质量保证是十分重要的。

通常，在确定病毒标本类型并进行采集后应将标本尽快送检，理想情况是室温下30min内送检，4℃环境下可在2～4h内送检，来不及处理的标本在4℃保存不应超过48h。但是病毒标本采集后可能由于多种原因导致标本不能在短时间内进行病毒核酸检测：如在一些无条件开展核酸检测的地区，一般会将采集到的临床病毒标本每隔一段时间(一般为1天)统一送到上级医院实验室或第三方病毒实验室进行检测。由于无法随时送检，且运送过程也需要一定的时间，所以标本从采集到送至实验室进行检测通常大于24h。如果遇到不易确诊的病毒或者新型病毒，标本需要转送至级别更高的实验室进行检测，这时，从采集到检测的时间将会更长，可能达到数周甚至数月。另外，在对某地区进行病毒流行病学调查时，需要将不同时间采集的样品保存一段时间，而后集中统一进行实验检测，这段时间通常较长且多数情况无-80℃的储存条件。为应对以上种种实际情况，拥有能够在4℃条件下长期维持病毒基因组稳定性的病毒运送培养基显得极为重要。

目前国内运送培养基的生产厂家主要有：友康恒业生物科技(北京)有限公司、青岛高科技工业园海博生物技术有限公司、广东和信健康科技有限公司、广州阳普医疗科技股份有限公司等等；进口的运送培养基主要有Copan的UTM运送培养基等。现有的病毒运送培养基主要是依据病毒培养而设计的，其成分以维持pH7.4左右的等渗缓冲盐类加上小牛血清或BSA等蛋白质以及抑制其它微生物生长的抗生素等组成，以保持病毒颗粒完整，维持其生物学活性。但是目前病毒的诊断以核酸检测为主流，因此其运送培养基的目的是能够保持核酸的完整与稳定，并不要求保持病毒的生物学活性(许多病毒临床标本在检测前需要进行灭活处理)，因此只需要保证病毒基因组不被降解即可。而目前市场各类病毒运送培养基的成分复杂、不清晰，其使用定位与临床病毒核酸检测需求并不契合；且目前的病毒运送培养基成本高昂，这与日益增长的检测需求相矛盾。

发明内容

基于此，本发明的目的在于提供一种适用于核酸检测的病毒运送培养基及其制备方法，所述病毒运送培养基成分简单明确，价格低廉，且能更好地保持生物样本中病毒核酸的完整性，能够满足日益增长的临床病毒核酸检测需求。

具体技术方案为：

一种病毒运送培养基，所述病毒运送培养基为包含以下浓度组分的水溶液：