[发明专利]Claudin-18.2抗原多肽疫苗及其应用

说明书

本发明公开了一种Claudin‑18.2抗原多肽疫苗及其应用。所述疫苗包括具有SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:7中任一者或多者所示的序列或其保守变异型序列的多肽。所述疫苗能够诱导动物特异性产生Claudin‑18.2抗体，从而抑制胃癌细胞的生长。

技术领域

本发明涉及一种疫苗，具体涉及一种Claudin-18.2抗原多肽疫苗及其应用。

背景技术

癌症一直是人类的梦魇，攻克癌症也成为无数科学家和医学人士殚精竭虑、孜孜以求的“圣杯”。根据2014年《世界癌症报告》，2012年全世界有1400万新癌症病例，中国新诊断癌症病例为307万癌症死亡人数达820万(World Cancer Report 2014)。其中胃癌是全世界癌症死亡的第三大原因。2012年，全球共有约100万胃癌新增病例，而死亡病例则超过了70万。预计到2020年，中国癌症患病总数将达660万，其中胃癌总数将达到460万。我国由于饮食习惯，饮食结构和食品安全等原因，每年的胃癌患者呈现逐年明显上升趋势，因此功克和预防胃癌在现阶段是十分紧迫和必要的课题。

目前针对癌症的治疗方法有化学疗法，放射疗法，细胞疗法等。这些传统疗法在癌症治疗中往往仅取得某一程度的功效，在运用在这些方法进行治疗的同时，许多癌细胞周边的健康细胞也会遭到损毁，因此治疗性疫苗就应运而生了。所谓的治疗性疫苗是集疫苗的有效性、靶向药物的特异性、使用方便、治疗次数少、价廉等特点于一体的新制品。通过调节人体免疫应答，为治疗持续性感染疾病及肿瘤、自身免疫等疾病提供新途径。目前，治疗性疫苗已成为全球生物医药产业的一个新战略制高点。放眼医药市场，目前针对胃癌的有效药物主要是小分子药物以及为数不多的抗体药物，但是针对胃癌的疫苗还没有成功上市的。因此发现和发展一种新型的治疗性疫苗用来预防和治疗胃癌是必要和紧迫的。

Claudin蛋白由Shoichiro Tsukita及其同事在1998年发现，是细胞紧密连接的重要分子。其构成了细胞旁屏障，控制细胞间分子的流动(J Cell Biol.2000,149,13-16)。目前Claudin家族有20几个成员，Claudin蛋白家族与肿瘤关系密切，其异常表达可引起上皮细胞、内皮细胞等细胞结构破坏、功能受损，细胞膜紧密连接受损，从而导致癌细胞的凝聚力降低、分化变差及侵袭性增加，有利于肿瘤的发生、发展，从而增加癌症病患的机率。不同的Claudin蛋白表达在不同的组织，与各自组织肿瘤发生具有相关性，Claudin-1在结肠癌上，Claudin-10在肝细胞癌上，Claudin-18.2在胃癌上。

Claudin-18.2作为一个高度特异性的细胞表面分子，在正常的组织中仅表达在分化的胃粘膜上表皮细胞上，不表达在胃干细胞上。在原发性胃癌及其转移后癌症类型中大部分都表达Claudin-18.2分子(Mol.Cell Biol.2001,21,7380-7390.)。更为重要的是Claudin-18.2基本上只在肿瘤细胞表达，所以可以比较安全地用抗体来诱导杀伤或杀死癌细胞。目前国内外尚无针对Claudin-18.2这个靶点上市的小分子药物和抗体药物，仅有德国Ganymed公司开发的单抗药物IMAB362(Claudiximab)进入临床试验(Biotechn.J.2014,9,545-554)，而国内外并没有抗Claudin-18.2的治疗性疫苗进入临床研究，预示了巨大的临床应用场景。

多肽疫苗药物介于小分子和生物大分子之间，兼具生物大分子的高选择性和小分子的易合成、低成本、组织渗透等优势；但是一般的链状多肽不是很稳定，易被蛋白水解酶水解(见表1)，这也是困扰多肽药物领域的主要难题(Methods Mol.Biol.2008,494,177-186.)。而蛋白水解酶水解酰胺时需要多肽有一个舒展的构象，因此利用支架来锁定多肽的α螺旋结构可以有效地抑制多肽被蛋白水解酶水解。

表1