[发明专利]一种尿激酶的精制方法在审
申请号: | 202010652909.0 | 申请日: | 2020-07-08 |
公开(公告)号: | CN111647585A | 公开(公告)日: | 2020-09-11 |
发明(设计)人: | 顾京;李争;熊心磊;郭芬;张茜 | 申请(专利权)人: | 江苏尤里卡生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/72 | 分类号: | C12N9/72 |
代理公司: | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人: | 尉月丽 |
地址: | 211200 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 尿激酶 精制 方法 | ||
1.一种尿激酶的精制方法,其特征在于,包括以下步骤:
取尿激酶中间体溶液,上凝胶色谱柱,用平衡缓冲液洗脱,收集中段洗脱液,得到精制的尿激酶溶液;
其中,所述凝胶色谱柱的填料包括Superdex 75pg/GE、Superdex 200pg/GE、SephacrylS-100HR/GE、Chromadex 75PG/BESTCHROM和Chromadex200PG/BESTCHROM中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝胶色谱柱的填料为Superdex 75pg/GE。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述上凝胶色谱柱的蛋白浓度为2-20mg/mL。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述上凝胶色谱柱的蛋白浓度为10mg/mL。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述上凝胶色谱柱的上柱体积为柱体积的2-8%。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述平衡缓冲液为醋酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液和Tris-HCl缓冲液中的至少一种。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述平衡缓冲液为柠檬酸盐缓冲液。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述平衡缓冲液的pH4.5-8.0。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述洗脱是在电导值15-90ms/cm条件下进行。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述中段洗脱液是指保留时间40-70min的液体。
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