[发明专利]一种携载达拉菲尼的脂质纳米微泡超声造影剂制备方法

权利要求书

1.一种携载达拉菲尼的脂质纳米微泡超声造影剂制备方法，其特征在于：所述携载达拉菲尼的脂质纳米微泡超声造影剂制备方法具体包括如下步骤：

第一步：采用EDC-NHS酰胺反应法建立达拉菲尼与DSPE-PEG2000-COOH的共价连接，合成DSPE-PEG2000-Dabrafenib；第二步：采用薄膜水化法配制脂质悬混液；第三步：采用机械振荡法制备高浓度脂质纳米微泡超声造影剂。

2.根据权利要求1所述的一种携载达拉菲尼的脂质纳米微泡超声造影剂制备方法，其特征在于：所述第一步的具体操作方法为：首先将DSPE-PEG2000-COOH溶于医用级二甲基亚砜中，按照一定摩尔比加入EDC和NHS，在室温下进行振荡活化；然后将Dabrafenib与活化后生成的DSPE-PEG2000-COO-琥珀酰亚胺按照一定摩尔比混合使之发生酰胺反应，合成DSPE-PEG2000-Dabrafenib；待充分反应后，使用透析袋内除去未发生反应的EDC、NHS和Dabrafenib。

3.根据权利要求1所述的一种携载达拉菲尼的脂质纳米微泡超声造影剂制备方法, 其特征在于：所述第二步的具体操作方法为：旋蒸瓶中，按照一定摩尔比将的DPPC、DSPE-PEG2000-Dabrafenib和DSPE-PEG2000充分溶解于三氯甲烷中，均匀晃动旋蒸瓶至物质充分溶解、混合；将盛有混合物的旋蒸瓶放置于旋转蒸发仪上，待三氯甲烷充分挥发后，在瓶壁上形成一层厚度均匀的干性脂质薄膜；往旋蒸瓶中加入已被预热至37℃的甘油和PBS水合液水化薄膜，在恒温摇床上，待瓶壁薄膜脱落，形成均匀的脂质悬混液。

4.根据权利要求1所述的一种携载达拉菲尼的脂质纳米微泡超声造影剂制备方法, 其特征在于：所述第三步的具体操作方法为：将脂质悬混液置入盖有橡胶瓶塞的西林瓶中，然后使用注射器抽真空后注入惰性气体C₃F₈；将西林瓶置于银汞胶囊调和器上振荡90s，完成高浓度脂质纳米微泡超声造影剂的制备；最后，对制备好的造影剂进行Co60照射消毒，置于冰箱冷藏保存备用。

5.根据权利要求1所述的一种携载达拉菲尼的脂质纳米微泡超声造影剂制备方法, 其特征在于：所述第二步和第三步能够转变为第一步和第二步，转变的前提是第二步脂质悬混液配制时采用DPPC、DSPE-PEG2000-COOH和DSPE-PEG2000，两步中涉及的摩尔配比和制备方法不变。

6.根据权利要求1所述的一种携载达拉菲尼的脂质纳米微泡超声造影剂制备方法, 其特征在于：所述第一步EDC-NHS酰胺反应能够后移至第三步进行，即向经前两步制备的脂质纳米微泡悬混液中加入EDC和NHS，保持DSPE-PEG2000-COOH、EDC、NHS的摩尔配比不变，室温下振荡活化1h，然后以摩尔比1:1.5将Dabrafenib与活化后生成的DSPE-PEG2000-COO-琥珀酰亚胺混合发生酰胺反应，使纳米微泡壳膜成分中的DSPE-PEG2000-COOH转化为DSPE-PEG2000-Dabrafenib，最后将样品置于4℃下的透析袋内除去未发生反应的EDC、NHS和Dabrafenib。

7.根据权利要求2所述的一种携载达拉菲尼的脂质纳米微泡超声造影剂制备方法, 其特征在于：所述第一步中，DSPE-PEG2000-COOH、EDC和NHS的摩尔比为1:2:2。

8.根据权利要求3所述的一种携载达拉菲尼的脂质纳米微泡超声造影剂制备方法, 其特征在于：所述第二步中，DPPC、DSPE-PEG2000-Dabrafenib和DSPE-PEG2000的摩尔比为5:1:1。