[发明专利]一种尿激酶吸附剂及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 202010656257.8 申请日: 2020-07-09
公开(公告)号: CN111760556B 公开(公告)日: 2023-06-30
发明(设计)人: 顾京;李争;刘艳红;丁晶;黄俊杰;熊心磊 申请(专利权)人: 江苏尤里卡生物科技有限公司
主分类号: C12N9/72 分类号: C12N9/72;B01J20/22;B01J20/30
代理公司: 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 代理人: 尉月丽
地址: 211200 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 尿激酶 吸附剂 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种尿激酶吸附剂的制备方法:其特征在于,包括以下步骤:

S1、将硅胶高温活化,得到活化硅胶;

步骤S1中所述高温活化为:在125℃下烘干4h;

S2、将步骤S1得到的活化硅胶和偶联剂在有机溶剂中,回流反应8h,过滤、乙醇提取、水洗,得到前驱体1;

步骤S2中活化硅胶、偶联剂和有机溶剂的用量比例为100g:50mL:400mL;所述偶联剂为乙烯基甲基二乙氧硅烷,所述有机溶剂为甲苯;

S3、步骤S2得到的前驱体1与溴素反应至水溶液刚刚变红,过滤水洗,得到前躯体2;

S4、向步骤S3得到的前驱体2中加入400mL水和20g对氨基苯甲脒盐酸盐,调节pH至9,升温80℃反应8h,降温至30℃、过滤、乙醇提取、水洗、甩干,即得。

2.一种根据权利要求1所述的制备方法制备的尿激酶吸附剂。

3.一种从人尿中直接吸附尿激酶的方法,其特征在于,利用权利要求1所述的制备方法制备的尿激酶吸附剂进行吸附。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)将尿激酶吸附剂悬液注入带滤网的吸附柱,打开吸附柱的出水口,水流出吸附柱,尿激酶吸附剂形成吸附柱床;

(2)将步骤(1)得到的吸附柱放置于小便池/斗中,吸附人尿中的尿激酶,取回吸附柱床;

(3)将步骤(2)取回的吸附床柱用纯化水清洗,取出吸附剂;

(4)向步骤(3)得到的吸附剂加入平衡缓冲液,制成悬混液;

(5)将步骤(4)得到的悬混液装入层析柱,用洗脱缓冲液进行洗脱,收集到的洗脱液,即为尿激酶粗品溶液;

(6)将步骤(5)洗脱结束后的层析柱用再生缓冲液清洗,用纯化水冲洗至中性,取出尿激酶吸附剂。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述尿激酶吸附剂悬液中尿激酶吸附剂的质量分数为48-55%;

步骤(4)中所述平衡缓冲液:pH 6.4-7.8,含0.15-0.65M NaCl的0.05-0.15M的Tris-HCl缓冲液;

步骤(5)中所述洗脱缓冲液:pH2.0-3.0,0.05M-0.15M甘氨酸缓冲液;

步骤(6)中所述再生缓冲液为含0.1-0.2M醋酸的体积百分数为10-30%的乙醇水溶液。

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