[发明专利]一种血液样本中门冬氨酸的检测方法

说明书

本发明提供了一种血液样本中门冬氨酸的检测方法，该方法在采集、处理生物样本后，利用液相色谱‑质谱联用方法进行检测。本发明的检测方法特异性强、准确度和灵敏度高、分析时间短，为临床上诊断血液中门冬氨酸的缺乏或过量提供了可靠的实验依据。本发明所述血液样本中门冬氨酸的检测方法，样本采集、处理方式简单经济，采集时间点设计合理，能够有效消除后续检测分析过程中的系统误差，检测结果准确。

技术领域

本发明涉及生物检测分析领域，更具体地涉及一种血液样本中门冬氨酸的检测方法。

背景技术

门冬氨酸又称天门冬氨酸、天冬氨酸，是一种α-氨基酸，门冬氨酸的L-异构物是20种蛋白胺基酸之一，即蛋白质的构造单位。它的密码子是GAU和GAC。它与谷氨酸同为酸性氨基酸。门冬氨酸普遍存在于生物合成作用中。它是生物体内赖氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸等氨基酸及嘌呤、嘧啶碱基的合成前体。它可作为K⁺、Mg²⁺离子的载体向心肌输送电解质，从而改善心肌收缩功能，同时降低氧消耗，在冠状动脉循环障碍缺氧时，对心肌有保护作用。它参与鸟氨酸循环，促进氧和二氧化碳生成尿素，降低血液中氮和二氧化碳的量，增强肝脏功能，消除疲劳。此外，其是哺乳动物中枢神经系统中主要的兴奋性氨基酸类神经递质，其在脑中特定区域的浓度变化与帕金森病密切相关，表现为含量显著升高。

血液中门冬氨酸浓度对人体健康评价具有重要意义，测定血液中门冬氨酸水平可一定程度上反应人体生理情况的变化。目前，有关血清和血浆中门冬氨酸的测定方法报道很多，其中常见的方法有：氨基酸自动分析仪法、液相色谱法、气相色谱质谱联用法、液相色谱质谱联用法等，在众多的方法中，液相色谱法或液相串联质谱法为测定门冬氨酸的首选方法。通常，样本需经衍生化方法处理后再以仪器分析定量，存在着前处理复杂、干扰因素多、分析时间长、灵敏度不高、定性定量不够准确等问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种检测时间短、分离效果好、精确度和准确度更高、成本更低的血液样本中门冬氨酸的检测方法。

基于上述问题，发明人提供了一种血液样本中门冬氨酸的检测方法。在采集、处理生物样本后，利用液相色谱-质谱联用方法进行检测，检测条件如下：液相分析条件：

HPLC：LC-20A,SHIMADZU；

柱温箱：CTO-20A；

自动进样器：SIL-20ACXR；

控制器：CBM-20A；

脱气机：DGU-20A3R；

色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18 2.1*50mm,3.5μm，Agilent；

流动相：A：5mM乙酸铵水溶液(含0.1％甲酸)；

B：0.1％甲酸乙腈；

自动进样器洗针液：80％乙腈水；

自动进样器洗针程序：Rinse Mode:Before and after aspiration

Rinse Volume:200μL

Rinse Speed:35μL/sec；

流动相梯度：

流速：1.2mL/min；

自动进样器温度：4℃；

柱温：40℃；

进样体积：2μL；

运行时间：5.0min；

质谱分析条件：