[发明专利]一种比率型双光子荧光探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种比率型双光子荧光探针，其特征在于，其化学结构如下式所示：

2.权利要求1所述的比率型双光子荧光探针的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：将羟基四苯乙烯与六次甲基四胺反应得到化合物1，化合物1与邻氨基苯硫酚反应得到化合物2，化合物2中加入三氟甲磺酰氯生成最终产物，即为所述比率型双光子荧光探针TPE-BT-TF。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法反应过程如下：

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法步骤如下：

(1)向羟基四苯乙烯的溶剂体系中加入六次甲基四胺，加热回流得到化合物1；

(2)向化合物1的溶剂体系中加入邻氨基苯硫酚得到化合物2；

(3)向化合物2的溶剂体系中加入三氟甲磺酰氯得到比率型双光子荧光探针。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)的具体步骤为：将羟基四苯乙烯与六次甲基四胺溶解于乙酸和三氟乙酸的混合溶剂中，加热回流3～4h，用水淬灭反应后，萃取，旋干，通过色谱柱洗脱分离得到化合物1。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述色谱柱洗脱使用的洗脱剂为二氯甲烷及石油醚的混合溶液，其体积比V_石油醚：V_二氯甲烷＝1-5：1。

7.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述羟基四苯乙烯、六次甲基四胺、乙酸、三氟乙酸的用量比为0.34-0.45g：0.7-0.9g：3-4mL：3-4mL。

8.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)的具体步骤为：将化合物1与邻氨基苯硫酚溶于二氯甲烷和甲醇的混合溶液中，室温反应6h。

9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述化合物1、邻氨基苯硫酚、二氯甲烷及甲醇的比为0.15-0.20g：0.06-0.08mL：1.5-2mL：2.5-3.5mL。

10.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)的具体操作为：将化合物2溶于二氯甲烷，加入三氟甲磺酰氯，之后室温反应2h，旋干，残余物通过色谱柱纯化，得到所述比率型双光子荧光探针。

11.如权利要求10所述的制备方法，其特征在于，所述化合物2、三氟甲磺酰氯、二氯甲烷的比为0.02-0.05g：0.03-0.05mL：2-3mL。

12.权利要求1所述比率型双光子荧光探针在制备检测超氧阴离子探针中的应用。

13.如权利要求12所述的应用，其特征在于，所述超氧阴离子检测选自细胞样品、食物样品、环境样品的超氧阴离子检测。