[发明专利]猫疱疹病毒抗体序列、四肽链分子、免疫球蛋白分子

说明书

本发明属于病毒抗体技术领域，公开了一种猫疱疹病毒抗体序列、四肽链分子、免疫球蛋白分子及应用，序列为重链可变区氨基酸序列SEQ ID NO：1和核苷酸序列SEQ ID NO：3；轻链可变区氨基酸序列SEQ ID NO：2和核苷酸序列SEQ ID NO：4。序列的筛选方法包括：噬菌体抗体的制备；噬菌体抗体文库的淘筛；PhageELISA方法鉴定抗猫疱疹病毒猫源噬菌体单链抗体；将PhageELISA鉴定结果为阳性的scFv菌液送测序公司测序，得到猫源化的抗猫疱疹病毒的基因工程抗体的重链、轻链可变区序列。本发明为构建高亲和力、低免疫原性的猫源化抗猫疱疹病毒的基因工程抗体提供支持。对推动猫源化抗体药物的发展具有重要意义。

技术领域

本发明属于病毒抗体技术领域，尤其涉及一种病毒抗体序列、四肽链分子、免疫球蛋白分子及应用。

背景技术

目前，猫疱疹病毒I型(Feline herpesvirus 1，FHV-1)于1958年由美国Crandell和Maurer在当地患有呼吸疾病的仔猫体内首次完成分离和鉴定，确诊该病毒寄宿的主体是猫，不过在狮子与猎豹等猫科动物身上也发现了有感染的现象。FHV-1的传染途径重点包括口、鼻及结膜等引起宿主感染，其主要的潜伏部位是三叉神经系统。在临床症状上，FHV-1与FCV类似，两者都可以导致猫出现呼吸系统疾病。

目前对于猫疱疹病毒病临床治疗主要依赖于单克隆抗体，市售抗体多为异种动物免疫血清，虽然能保护幼龄动物和成年动物免受感染，但无法连续注射，否则将造成剧烈的过敏反应，严重时可导致动物死亡。另外，传统鼠源单克隆抗体对非鼠源体有较强的异源性和免疫原性，在体内应用时容易引起宿主的免疫排斥或过敏反应，使得鼠源单克隆抗体疗效降低，甚至在病体内产生严重后果,极大地限制了鼠源单克隆抗体的临床应用的效果。

目前，噬菌体展示技术有着越来越广泛的应用，更多的本动物源化的噬菌体展示抗体库成功构建，尤其是一些单抗药物的研发，使噬菌体展示技术得到了更好地发展。目前，大多构建的为免疫噬菌体库，因为通过免疫后动物体内的抗体水平提高，更有利于筛选到针对特异性抗原的抗体，对后续诊断及治疗效果会更有优势。目前，大多数均为单克隆抗体，而针对猫源的噬菌体抗体库避免了抗体使用过程中的干扰因素，为猫疱疹病毒的诊断和治疗单抗的制备提供了理论依据。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：目前，并未有人构建过针对猫源的噬菌体抗体库。

解决以上问题及缺陷的难度为：要想得到一定规模的抗体库，首先要做的是借助RT-PCR技术，获取机体本源的全套抗体基因，目前关于猫源基因序列报道较少，需要我们对抗体轻、重链可变区序列进行多对引物验证。

解决以上问题及缺陷的意义为：有利于筛选到针对特异性抗原的抗体，对后续诊断及治疗效果会更有优势。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种病毒抗体序列、四肽链分子、免疫球蛋白分子及应用。

本发明是这样实现的，一种病毒抗体序列，所述病毒抗体序列为重链可变区氨基酸序列SEQ ID NO：1和核苷酸序列SEQ ID NO：3；轻链可变区氨基酸序列SEQ ID NO：2和核苷酸序列SEQ ID NO：4。

本发明的另一目的在于提供一种由所述病毒抗体序列的重链和轻链通过二硫键连接形成一个四肽链分子。

本发明的另一目的在于提供一种包含所述四肽链分子的免疫球蛋白分子。

本发明的另一目的在于提供一种猫疱疹病毒的检测方法，所述猫疱疹病毒的检测方法使用所述的病毒抗体序列。

本发明的另一目的在于提供一种治疗猫疱疹病毒单抗的制备方法，所述治疗猫疱疹病毒单抗的制备方法使用所述的病毒抗体序列。

本发明的另一目的在于提供一种所述病毒抗体序列的筛选方法，所述病毒抗体序列的筛选方法包括：