[发明专利]一种宫颈癌的外周血TCR标志物及其检测试剂盒和应用

说明书

本发明公开了一种宫颈癌的外周血TCR标志物及其检测试剂盒和应用。该标志物包括序列为SEQ ID NO.1～100所示的蛋白中的至少一种。本发明基于高通量测序方法，只需要采取少量外周血，提取RNA，通过对样本的处理建立免疫图谱文库，再经过高通量测序和TCR数据分析，首先确定宫颈癌外周血中特征性TCR序列，然后将待测样本测试结果与该特征性TCR序列比对，从而确定是否患有宫颈癌。本发明能够同时比较巨大数量的宫颈癌特异性TCR序列，相比单独检测一种或几种标记物，具有更高的特异性和准确性，提高了诊断效率。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种宫颈癌的外周血TCR标志物及其检测试剂盒和应用。

背景技术

根据CGCS第26届中国肿瘤防治协会报告，每年新发宫颈癌病例在50万左右(世界范围)，80％以上的病例发生在发展中国家。我国每年新发病例约13万，占全世界新发病例总数的28％。2018年发布的ICO中国HPV和相关疾病报告显示，在中国15-44岁女性中，子宫颈癌的发病率高居恶性肿瘤第三位，以成为女性癌症死亡的第二大原因。中国2018年约有47739名女性因子宫颈癌死亡。且子宫颈癌死亡率呈上升趋势，威胁中国女性生命安全。高危型别HPV持续感染是子宫颈癌的主要致病“元凶”.HPV感染率很高，一项基于美国人群的研究显示，有性行为的男性和女性一生中感染HPV的几率高达85％-90％。大多数感染可以依靠自身的免疫力清除。小部分患者高危型别HPV持续感染，经数十年时间可导致病变并最终进展为子宫颈癌。

中国女性约98％的子宫颈癌由高危型HPV导致，其中69％子宫颈癌有高危型别HPV16/18感染，23％子宫颈癌有高危型别HPV31/33/45/52/58感染,其他高危型别HPV感染致癌率达6％。目前，子宫颈癌的综合防控主要分为三级。以减少HPV感染为一级预防：1.健康教育；2、接种HPV疫苗。对癌前病变进行筛查、诊断和治疗为二级预防(最有效可控的预防阶段)，现有的主要筛查方法主要有：宫颈细胞学涂片、HPV检测、阴道镜检查后的随访管理。三级预防也是最无奈的方式，对子宫颈癌进行治疗。

目前针对卵巢癌的诊断手段主要分为视诊、触诊、细胞学涂片检查、组织学检查、腔镜检查、影像学检查、肿瘤标志物检查。

1、视诊：在充足照明条件下，直接观察外阴和通过阴道窥器观察阴道及宫颈。可直接观察癌浸范围，肿瘤位置、范围、形态、体积及与周围组织的关系，但收视线范围及肿瘤大小影响，有局限性且无法定性。

2、触诊：肿瘤的质地、浸润范围及其与周围的关系等必须通过触诊确定。有些黏膜下及颈管内浸润，触诊比视诊更准确。但依旧受接触面积等人为因素影响，且对肿瘤无法定性。

3、细胞学涂片检查及组织学检查：细胞学涂片检查目前为发现宫颈癌前病变和早期宫颈癌的主要手段，特别是对临床体征不明显的早期病变的诊断。宫颈癌前病变和早期宫颈癌的诊断均应有活体组织学检查证实。大多采用液基细胞学检查法(TCT)，很少给患者带来痛苦，是目前比较有效的防癌方法。由于我国病理医生的缺乏，涂片的阅读准确性很难达到100％。目前也没有数据证实，现有的检查手段能明显降低人群总体上因宫颈癌病死的人数。关键的还是合理的筛查时间间隔且适龄女性一定要记得复查。

4、腔镜检查：对发现宫颈癌前病变、早期宫颈癌、确定病变部位有重要作用，可提高活检的阳性率。接受阴道镜活检均要做颈管刮术。在强光源照射下通过阴道镜直接观察阴道，放大6-20倍，借以观察肉眼看不到的阴道和宫颈的较微小病变。在可疑部分行定位活检，可提高确诊率。由于临近膀胱组织，活检取样是有比较大的难度，因此对临床医生的要求较高，需要临床医生有比较全面的妇产科手术经验。整个检查过程由于属于侵入性检测，患者需要忍受不适而且活检后普遍需要10-14天的时间恢复。此操作对医院的诊疗条件有一定要求，不具备相应条件的需要转诊上级医院。

5、影像学检查