[发明专利]络石藤中具抗炎活性的甘油酯类化合物及其制备方法

说明书

本发明公开了络石藤中具有抗炎活性的甘油酯类化合物及其制备方法，所述的甘油酯类化合物有两个，分别为1‑hexadecanoyl propan‑2,3‑diol化合物1和1‑heptadecanoyl propan‑2,3‑diol化合物2。其中化合物2为新化合物，并通过Griess法、ELISA等实验进一步研究化合物1的抗炎效果，结果显示化合物1对NO抑制作用的ICsubgt;50/subgt;值为15.76μM，对炎症因子TNF‑α和IL‑6也均具有一定的抑制作用，其中对IL‑6的抑制作用强于TNF‑α。实验还通过Western Blot考察了化合物1对RAW 264.7细胞中诱导型iNOS的蛋白表达，结果显示化合物1能够明显抑制RAW 264.7细胞中诱导型iNOS的蛋白表达，表明化合物1通过抑制炎症相关的iNOS的表达，从而抑制炎症的发生。本发明从络石藤中发现结构新颖的、具有抗炎活性的甘油酯类化合物，为制备抗炎新药奠定基础。

技术领域

本发明涉及甘油酯类化合物，具体是一种从络石藤中提取分离出来的具抗炎活性的甘油酯类化合物。

背景技术

络石藤来源为夹竹桃科植物络石（ Trachelospermum jasminoides（Lindl）Lem）的干燥带叶藤茎。在古代，络石藤主治风湿热痹、筋脉拘挛、腰膝酸痛、咽肿喉痹、诸疮肿毒、跌打损伤，外用出血等症；当前络石藤主要用于治疗风湿关节炎、肌肉痛，特别是伴有四肢拘挛，屈伸不便者，疗效显著。

据文献报道，络石藤抗炎成分主要为木脂素类成分，尤其是二苄基丁内酯类木脂素，络石藤中关于甘油酯类化合物的报道极少，而具有抗炎活性的甘油酯类化合物未见报道。

为了进一步从络石藤中发现新的抗炎活性成分，为新药开发奠定基础，发明人对络石藤进行了化学成分的深入研究。结合抗炎药效活性筛选，从络石藤中分离提取，并鉴定了具有抗炎活性的甘油酯类化合物。

发明内容

本发明公开一种从络石藤中提取分离出来的两个甘油酯类化合物，并公开了提取分离方法、结构鉴定，并对其中一个化合物抗炎活性进行了实验。

实现本发明目的的技术方案是：

络石藤中具抗炎活性的甘油酯类化合物，所述的甘油酯类化合物有两个，分别为1-hexadecanoyl propan-2,3-diol化合物1和1-heptadecanoyl propan-2,3-diol化合物2，具有下述式所示结构：

。

上述络石藤的甘油酯类化合物的提取分离方法，包括如下步骤：

（1）将络石藤晒干之后粉碎，取粉碎后的络石藤20kg，加入95%乙醇水溶液没过络石藤表面，浸泡7-10天，减压浓缩回收乙醇得到总浸膏，将总浸膏悬浮于水置于分液漏斗中，加入乙酸乙酯萃取，减压回收溶剂得乙酸乙酯部位479.8 g；

（2）将乙酸乙酯部位经正相硅胶柱，设置浓度梯度进行洗脱，依次得到洗脱流份I–XIII；

（3）将流份VI经MCI色谱柱层析，甲醇水梯度洗脱，得VI-1至VI-9 九个流份，VI-3经Sephadex LH-20凝胶柱，甲醇洗脱，重结晶得到1-heptadecanoyl propan-2,3-diol化合物2（20.0 mg）；

VI-9经Sephadex LH-20凝胶柱，50%甲醇水洗脱，再经ODS C₁₈反相柱得到1-hexadecanoyl propan-2,3-diol化合物1（1.0 mg）。

步骤（2）所述的正相硅胶柱，洗脱剂采用体积比为，石油醚:丙酮=10:1，至氯仿:甲醇=1: 1梯度洗脱。