[发明专利]一种用于检测细胞凋亡信号通路的PCR试剂及其应用

说明书

本发明提供了一种用于检测细胞凋亡信号通路的PCR试剂及其应用，本发明所述PCR试剂包括检测ABL1基因、AIFM1基因、AKT1基因、APAF1基因、BAD基因等相关基因和内参基因的PCR反应引物。本发明将涉及细胞凋亡的信号分子集中在一个平板上，通过做一次实时荧光定量PCR反应，反应细胞的生存状态，与正常的细胞、口腔鳞癌细胞系做对比，探讨细胞凋亡信号通路在口腔肿瘤/正常细胞中的可能途径，为研究关键蛋白的调控提供最直接的证据；本发明从转录水平快速准确的找到细胞凋亡核心信号通路相关分子，为抗癌药物筛选、新靶向药物的机制探讨等提供了有力的工具。

技术领域

本发明属于分子生物学领域，尤其涉及一种用于检测细胞凋亡信号通路的PCR试剂及其应用。

背景技术

细胞凋亡信号通路是存在于生物体内的一条极其重要的信号传导通路，尤其是对于肿瘤细胞的调节起着非常重要的作用。目前，细胞凋亡一般由生理或病理性因素引起。在细胞凋亡过程中，细胞缩小，DNA被核酸内切酶降解成180bp-200bp片段属于有层次之断裂。细胞凋亡是更常见的细胞死亡形式。

目前研究细胞凋亡信号通路的核心分子调控机制，已经成为治疗肿瘤的一种关键手段，已经成为研究开发肿瘤药物研发领域的急需解决的重要问题。

发明内容

针对现有技术中如何确定细胞凋亡的核心信号分子的调控，如何解释核心分子在肿瘤细胞中的变化的困难，本发明提供了一种用于检测细胞凋亡信号通路的PCR试剂及其应用。本发明将涉及细胞信号凋亡的信号分子集中在一个平板上，通过做一次实时荧光定量PCR反应，反应细胞的生存状态，探讨在细胞中引起细胞凋亡信号通路变化的可能靶分子与靶途径，为研究核心细胞凋亡信号蛋白的调节提供最直接的证据。

为实现上述发明目的，本发明采用下述技术方案予以实现：

一种用于检测细胞凋亡信号通路的试剂，它包括以下引物：

(1)检测ABL1基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-ATCACGCCAGTCAACAGTCT-3'(SEQ ID NO:1)；

5'-TACACCCTCCCTTCGTATCT-3'(SEQ ID NO:2)；

(2)检测AIFM1基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-TCCAGCGATGGCATGTTCC-3'(SEQ ID NO:3)；

5'-CCTACTGTTGATAAGCCCACA-3'(SEQ ID NO:4)；

(3)检测AKT1基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-GTGATCCTGGTGAAGGAGA-3'(SEQ ID NO:5)；

5'-TTAATGTGCCCGTCCTTGT-3'(SEQ ID NO:6)；

(4)检测APAF1基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-CACACGGTTGGATCAGGAT-3'(SEQ ID NO:7)；

5'-GGAGACGGTCTTTAGCCTCT-3'(SEQ ID NO:8)；

(5)检测BAD基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-CCAGAGTTTGAGCCGAGTG-3'(SEQ ID NO:9)；

5'-CCATCCCTTCGTCGTCCT-3'(SEQ ID NO:10)；

(6)检测BAG1基因的PCR反应引物，其引物序列如下：