[发明专利]一种病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条有效
申请号: | 202010670282.1 | 申请日: | 2020-07-13 |
公开(公告)号: | CN111781378B | 公开(公告)日: | 2023-04-14 |
发明(设计)人: | 祁寒松;任晓丽 | 申请(专利权)人: | 祁寒松 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/577;G01N33/569;G01N33/58;G01N33/558 |
代理公司: | 北京麦汇智云知识产权代理有限公司 11754 | 代理人: | 曹治丽 |
地址: | 620360 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 病原 及其 抗体 检测 鉴别 诊断 胶体 试纸 | ||
1.一种病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条,包括PVC板、样品垫和吸水垫,所述样品垫和吸水垫之间设有硝酸纤维素膜,所述硝酸纤维素膜的一端和样品垫紧密衔接,所述硝酸纤维素膜的另一端和吸水垫紧密衔接,其特征在于:
所述硝酸纤维素膜上从样品垫到吸水垫方向依次设有金标垫、用于检测病原的V线、用于检测具有免疫评价标准的抗体的B线和用于检测自然感染所产生的特有抗体的E线,所述E线后还设置有质控线;
所述金标垫上吸附有机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白;
所述缺失基因的截短体蛋白为不包含A表位但包含B表位的截短体蛋白;
所述V线上喷涂特定病原的结构蛋白D的抗体D’,当样品中有待检测病毒,样品中的病毒会首先与金标垫上的缺失基因的A表位的抗体A’结合,与缺失基因的A表位的抗原A’结合的病毒继续移动与V线上的抗体D’结合,发生显色;反之,不显色;
所述B线上喷涂抗原C对应的抗体C’,当样品中有抗原C的抗体时,样品中的抗体会首先与金标垫上的抗原C结合,占据抗原C上能与抗体C’结合的表位,从而竞争性抑制B线上的抗体C’与抗原C结合,此时B线不显色;反之,显色;
所述E线上喷涂缺失基因的B表位的抗体B’,当样品中有针对缺失基因的抗体时,样品中针对缺失基因的抗体会首先与金标垫上的缺失基因的截短体蛋白B结合,从而,在样品继续移动到E线时,不会再与此处抗体B’结合,此时E线不显色;反之,显色。
2.根据权利要求1所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条,其特征在于,所述质控线上喷涂有能与鼠源IgG蛋白反应的山羊抗鼠源IgG蛋白的抗体。
3.根据权利要求1所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条,其特征在于,所述抗体A’为单克隆抗体。
4.根据权利要求1所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条,其特征在于,所述抗体B’为单克隆抗体。
5.根据权利要求1所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条,其特征在于,所述抗体C’为单克隆抗体。
6.根据权利要求1所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条,其特征在于,所述抗体D’为单克隆抗体。
7.根据权利要求2所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条,其特征在于,所述山羊抗鼠源IgG蛋白的抗体为单克隆抗体。
8.根据权利要求1所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条,其特征在于,所述金标垫上吸附的机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白通过如下方式制备而成:将机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白加入胶体金溶液,搅拌混匀,得到混合液一,再向混合液一中加入稳定剂,离心去上清,加入金标缓冲溶液,得到金标蛋白溶液,将金标垫吸附金标蛋白溶液,即得到吸附有胶体金标记的机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白的金标垫。
9.根据权利要求8所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条,其特征在于,所述胶体金溶液的粒径为25nm。
10.根据权利要求9所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条,其特征在于,所述稳定剂为终浓度为0.01~1wt%的PEG -20000。
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