[发明专利]抗肌红蛋白的抗体、检测肌红蛋白的试剂盒和方法

说明书

本发明公开了一种抗肌红蛋白的抗体、检测肌红蛋白的试剂盒和方法，涉及抗体技术领域。本发明公开的抗体或其功能性片段包括重链互补决定区和轻链互补决定区。该抗体或其功能性片段对肌红蛋白具有结合能力和较好的亲和力，使用该抗体或其功能性片段检测肌红蛋白的特异性和灵敏度较好。

技术领域

本发明涉及抗体技术领域，具体而言，涉及一种抗肌红蛋白的抗体、检测肌红蛋白的试剂盒和 方法。

背景技术

肌红蛋白(肌红蛋白globin,Mb)是哺乳动物细胞(主要是肌细胞)储存和分配氧的蛋白质，它 的氧饱和曲线为双曲线型。它是由一条多肽链和一个辅基血红素构成，相对分子质量为16700，含 153个氨基酸残基。除去血红素的脱辅基肌红蛋白称珠蛋白(globin)，它和血红蛋白的亚基(a-珠蛋白 链和P-珠蛋白链)在氨基酸序列具有明显的同源性，它们的构象和功能也极其相似。

肌红蛋白的多肽链中氨基酸残基上的疏水侧链大都在分子内部,亲水侧链多位于分子表面,形成 水溶性较好的水溶性较好的紧密球型三维结构，极性氨基酸分布在分子表面，内部存在一口袋形空 穴，血红素在此空穴中保持稳定位置。这种构象非常有利于运氧和储氧功能，同时也使血红素在多 肽链中保持稳定。肌红蛋白可逆地与氧结合，把氧从肌细胞附近毛细血管的血液通过细胞膜运到肌 细胞中，以MbO₂形式暂时贮氧，并可携带氧在肌肉中运动,在肌肉急剧运动时把氧释放出来，以保 障肌肉发生强烈代谢时对氧的需要。肌红蛋白表达水平的增加是动物对低氧适应的机制之一。因此， 在低氧分压状态下，组织既可以通过肌红蛋白储存氧,同时也促进了氧向细胞内弥散,从而向线粒体供 氧,有益于改善组织氧的弥散，因此肌红蛋白在O₂的贮存、PO₂的缓冲，促进氧的扩散起着重要作用。

急性心肌梗死临床上主要是由于各种诱因导致的心肌耗氧量急剧增加，冠心病患者由于冠状动 脉已发生硬化、狭窄，不能充分扩张而造成持续性缺血缺氧，所以目前采用心肌钙蛋白I/肌红蛋白/ 肌酸激酶同工酶(CK-MB)的快速诊断试剂，可作为心肌梗死突发时的快速的辅助诊断。其中肌红 蛋白可作为AMI(急性心肌梗死)的早期诊断标志物：通过动态检测二次血清肌红蛋白水平可早期诊 断是否有急性心肌梗死发生。如第二次检测值明显高于第一次检测值，则具有极高的阳性预报价值。

肌红蛋白的检测可以用于对AMI的排除诊断：由于肌红蛋白半寿期短(15min)，胸痛发作后6～ 12小时不升高，有助于排除AMI的诊断，是筛查AMI很好的指标；如动态检测二次测定值间无差 异，则具有100％的阴性预报价值，排除急性心肌梗死的可能性。

肌红蛋白的检测也可以估测心梗范围：可根据其动态变化曲线早期估计，肌红蛋白峰值小于参 考值上限10倍，高峰期持续时间短的患者，心梗范围较小，而肌红蛋白峰值大于参考值上限10倍， 高峰期持续时间较长或呈双峰、多峰的患者，心梗范围较大。

肌红蛋白的检测还可以观察有无再梗塞或者梗塞再扩展：由于在AMI后血中肌红蛋白很快从肾 脏清除，发病l8～30小时内可完全恢复到正常水平。故肌红蛋白测定有助于在AMI病程中观察有 无再梗塞或者梗塞再扩展。如峰值期持续时间较长，超过24小时，恢复正常缓慢，超过4天以上， 或下降过程再度升高形成双峰、多峰，则提示可能发生心梗延展或新的部位又发生心梗。

此外肌红蛋白的检测对溶栓再通的判断，准确性可达95％以上；对于AMH的预测预后等方面 也有深刻的临床应用价值。