[发明专利]口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品及其制备方法在审
申请号: | 202010671559.2 | 申请日: | 2020-07-13 |
公开(公告)号: | CN111690712A | 公开(公告)日: | 2020-09-22 |
发明(设计)人: | 石嵩;吕雨莎;马师良;张惠媛;刘鑫 | 申请(专利权)人: | 北京海关技术中心 |
主分类号: | C12Q1/24 | 分类号: | C12Q1/24;C12Q1/14 |
代理公司: | 北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙) 11531 | 代理人: | 于鹏 |
地址: | 100026*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 口罩 金黄色 葡萄球菌 定性 检测 能力 验证 样品 及其 制备 方法 | ||
1.口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品,其特征在于,包括阴性样品和阳性样品,其中,阳性样品含有基质、目标菌和干扰菌,阴性样品含有基质和干扰菌;基质为口罩,目标菌为金黄色葡萄球菌,干扰菌为粪肠球菌、大肠埃希氏菌、蕈状芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌、头状葡萄球菌、英诺克李斯特氏菌中的一种或多种。
2.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品,其特征在于,样品中的菌浓度为103-106cfu/mL。
3.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品,其特征在于,所述阳性样品的目标菌与干扰菌按体积比1:2-3的比例混合成混合菌,添加至基质中。
4.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品,其特征在于,所述样品为冻干样品,冻干保护剂含有体积分数为5-12%的海藻糖、体积分数为2-8%的谷氨酸钠以及体积分数为0.5-3%的明胶。
5.如权利要求4所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品,其特征在于,每个菌种与冻干保护剂的体积比均为1:9~3:7。
6.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品,其特征在于,所述基质的处理方法为:取一次性口罩,剔除挂耳皮筋及金属鼻托部分,裁剪成小块,用热熔封口机重新封口制成可吸水的再制口罩,再制口罩灭菌后备用。
7.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、菌株复苏传代
将每种菌株进行复苏,并对复苏的菌株进行鉴定;
S2、菌株扩增
复苏后单一的活菌株在36℃±1℃温度下培养36h,用无菌生理盐水洗脱,并逐级稀释至菌浓度为103-106cfu/mL,按照1:9~3:7的比例与冻干保护剂混合,制成相应单一菌种的冻干菌悬液;
S3、菌悬液配制
阳性样品按目标菌的目标浓度102-105cfu/mL与干扰菌的每种菌目标浓度102-105cfu/mL配制菌悬液,按目标菌和干扰菌体积比1:2-3比例混合,制成混合菌悬液,置于磁力搅拌器上不断搅拌;
阴性样品的干扰菌按每种菌目标浓度103-106cfu/mL等体积混合,制成混合菌悬液,置于磁力搅拌器上不断搅拌;
S4、基质处理
取一次性口罩,剔除挂耳皮筋及金属鼻托部分,裁剪成小块,用热熔封口机重新封口制成可吸水的再制口罩,再制口罩灭菌后备用;
S5、冻干
将混合菌悬液滴加在每份口罩基质中,待口罩将液体完全吸收后将其装入样品瓶中冻干,得到冻干样品。
8.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品的制备方法,其特征在于,步骤S1中将每种菌株分别接种至TSA培养基,36℃±1℃温度下有氧培养36h。
9.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品的制备方法,其特征在于,步骤S2的冻干保护剂含有体积分数为5-12%的海藻糖、体积分数为2-8%的谷氨酸钠以及体积分数为0.5-3%的明胶。
10.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品的制备方法,其特征在于,步骤S5中冻干时间为40-50h。
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