[发明专利]口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品及其制备方法

权利要求书

1.口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品，其特征在于，包括阴性样品和阳性样品，其中，阳性样品含有基质、目标菌和干扰菌，阴性样品含有基质和干扰菌；基质为口罩，目标菌为金黄色葡萄球菌，干扰菌为粪肠球菌、大肠埃希氏菌、蕈状芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌、头状葡萄球菌、英诺克李斯特氏菌中的一种或多种。

2.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品，其特征在于，样品中的菌浓度为10³-10⁶cfu/mL。

3.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品，其特征在于，所述阳性样品的目标菌与干扰菌按体积比1:2-3的比例混合成混合菌，添加至基质中。

4.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品，其特征在于，所述样品为冻干样品，冻干保护剂含有体积分数为5-12％的海藻糖、体积分数为2-8％的谷氨酸钠以及体积分数为0.5-3％的明胶。

5.如权利要求4所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品，其特征在于，每个菌种与冻干保护剂的体积比均为1:9～3:7。

6.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品，其特征在于，所述基质的处理方法为：取一次性口罩，剔除挂耳皮筋及金属鼻托部分，裁剪成小块，用热熔封口机重新封口制成可吸水的再制口罩，再制口罩灭菌后备用。

7.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、菌株复苏传代

将每种菌株进行复苏，并对复苏的菌株进行鉴定；

S2、菌株扩增

复苏后单一的活菌株在36℃±1℃温度下培养36h，用无菌生理盐水洗脱，并逐级稀释至菌浓度为10³-10⁶cfu/mL，按照1:9～3:7的比例与冻干保护剂混合，制成相应单一菌种的冻干菌悬液；

S3、菌悬液配制

阳性样品按目标菌的目标浓度10²-10⁵cfu/mL与干扰菌的每种菌目标浓度10²-10⁵cfu/mL配制菌悬液，按目标菌和干扰菌体积比1:2-3比例混合，制成混合菌悬液，置于磁力搅拌器上不断搅拌；

阴性样品的干扰菌按每种菌目标浓度10³-10⁶cfu/mL等体积混合，制成混合菌悬液，置于磁力搅拌器上不断搅拌；

S4、基质处理

取一次性口罩，剔除挂耳皮筋及金属鼻托部分，裁剪成小块，用热熔封口机重新封口制成可吸水的再制口罩，再制口罩灭菌后备用；

S5、冻干

将混合菌悬液滴加在每份口罩基质中，待口罩将液体完全吸收后将其装入样品瓶中冻干，得到冻干样品。

8.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品的制备方法，其特征在于，步骤S1中将每种菌株分别接种至TSA培养基，36℃±1℃温度下有氧培养36h。

9.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品的制备方法，其特征在于，步骤S2的冻干保护剂含有体积分数为5-12％的海藻糖、体积分数为2-8％的谷氨酸钠以及体积分数为0.5-3％的明胶。

10.如权利要求1所述的口罩中金黄色葡萄球菌定性检测能力验证样品的制备方法，其特征在于，步骤S5中冻干时间为40-50h。