[发明专利]一种源于竹蛏寡肽及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及干细胞技术领域，尤其涉及一种源于竹蛏寡肽及其制备方法和在干细胞技术中的应用，本发明公开了一种寡肽促进剂作为骨髓间充质干细胞成骨分化促进剂的应用，寡肽促进剂为中寡肽为竹蛏中提取的的竹蛏寡肽，竹蛏寡肽的制备方法如下：（1）将竹蛏去壳、清洗后捣碎，用搅碎机搅碎，加入蒸馏水，然后放入水浴中加热，进行热处理；（2）将步骤（1）的产物加入蛋白酶进行酶解，酶解过程中采用超声波辅助酶解；（3）步骤（2）所得的酶解产物进行超滤分离纯化，低温干燥得到所需的竹蛏寡肽。通过ALP酶活性检测，茜素红染色证明促进剂能够存进骨髓间充质干细胞的ALP酶活性，钙化水平，因此，可以用于促进骨髓间充质干细胞的成骨转化。

技术领域

本发明涉及干细胞技术领域，尤其涉及一种源于竹蛏寡肽及其制备方法和在干细胞技术中的应用。

背景技术

竹蛏属瓣鳃纲真瓣鳃 目竹蛏科，一般生活在风平浪静、有淡水注入的海湾滩涂上，掘穴而居。其形体呈圆柱形，略带侧扁，外壳脆而薄，略呈长方形。大竹蛏软体部分富含氨基酸，蛋白质的营养价值高，是优质的蛋白质源，可制作海鲜调味料和营养保健品。

骨髓间充质干细胞是成体干细胞的一种，骨髓间充质干细胞来源于间质，具有高度的可塑性。骨髓间充质干细胞的功能是为造血提供结构和功能支持。在一定的条件刺激下，骨髓间充质干细胞可以分化为软骨细胞，成骨细胞，脂肪细胞以及神经细胞等。由于骨髓间充质干细胞具有强大的自我更新能力和多向分化潜能，因此在维持骨的动态平衡以及缺损修复再生方面起着重大作用。因此，研究骨髓间充质干细胞的成骨机制对于治疗骨质疏松等代谢性骨病的具有重要的临床意义。

但是目前骨髓间充质干细胞成骨转化效率不高，因此，寻找的新的能够促进间充质干细胞成骨转化的促进剂，对于间充质干细胞的进一步开发利用具有重要的意义。

发明内容

为了提高骨髓间充质干细胞成骨转化效率，本发明提供了一种源于竹蛏寡肽及其制备方法和应用。

本发明提供了一种源于竹蛏寡肽的制备方法，包括以下步骤:

（1）将竹蛏去壳、清洗后捣碎，用搅碎机搅碎，加入蒸馏水，然后放入水浴中加热，进行热处理；

（2）将步骤（1）的产物加入蛋白酶进行酶解，酶解过程中采用超声波辅助酶解；

（3）步骤（2）所得的酶解产物进行超滤分离纯化，低温干燥得到所需的竹蛏寡肽。

优选地，所述步骤（1）中水浴加热的温度为40-70℃，时间为15-30min。

优选地，加入的蛋白酶为胰蛋白酶，所述胰蛋白酶的加入量5-12%，PH为7.2-8.3，酶解温度为35-40℃。

优选地，所述第（2）步的超声波辅助酶解中，超声功率为50-120W。

优选地，所述超滤分离纯化中，过滤温度为35-45℃，压力为11-14psi。

本发明还提供了一种由述源于竹蛏寡肽的制备方法制得的寡肽产品

本发明还提供一种源于竹蛏寡肽作为骨髓间充质干细胞成骨分化促进剂的应用。

上述应用中所述竹蛏寡肽的制备方法如下：

（1）将竹蛏去壳、清洗后捣碎，用搅碎机搅碎，加入蒸馏水，然后放入水浴中加热，进行热处理，水浴加热的温度为40-70℃，时间为15-30min；

（2）将步骤（1）的产物加入蛋白酶进行酶解，酶解过程中采用超声波辅助酶解，加入的蛋白酶为胰蛋白酶，所述胰蛋白酶的加入量5-12%，PH为7.2-8.3，酶解温度为35-40℃；

（3）步骤（2）所得的酶解产物进行超滤分离纯化，低温干燥得到所需的竹蛏寡肽。