[发明专利]基于新型腺病毒载体Sad23L和/或Ad49L的新型冠状病毒肺炎疫苗

说明书

本发明公开了一种基于新型腺病毒载体Sad23L和/或Ad49L的新型冠状病毒肺炎COVID‑19疫苗。通过优化外源基因使得外源蛋白的表达能够明显提高，同时进一步尝试使用人稀有或者猴的腺病毒作为载体，逃避预存的针对常见腺病毒的免疫反应，本发明获得的新型冠状病毒肺炎COVID‑19疫苗能够在动物体内诱导产生高水平的体液和细胞免疫，在动物免疫之后没有发现副作用的出现。本发明新型冠状病毒肺炎COVID‑19疫苗是安全有效且可以进行快速大量的制备，因此是可用于预防SARS‑CoV‑2的感染的候选疫苗株。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于新型腺病毒载体Sad23L和/或Ad49L研制的新型冠状病毒肺炎COVID-19疫苗。

背景技术

2019年冠状病毒病（COVID-19）病原体被鉴定为新型冠状病毒（severe acuterespiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）是一种类似重症急性呼吸道综合征冠状病毒（SARS-CoV，约79%）和中东呼吸道综合征冠状病毒（MERA-CoV，约50%）的ß冠状病毒属（Betacoronavirus）、Sarbecovirus 亚属的新型冠状病毒。SARS-CoV-2的人-人传播能力强于SARS-CoV和MERS-CoV，但其致病力低于SARS-CoV，存在轻症或无明显临床症状感染者。鉴于隐匿性带毒者的存在，可以推测在一级响应措施状态下，即使疫情得到了有效控制，但感染者携带的SARS-CoV-2可能会像MERS-CoV一样呈现持续的散发流行，时间可能长达1-2年或甚至数年。因此，研发有效的COVID-19疫苗仍是控制疫情或彻底清除疫情的最佳手段和迫切需求。

SARS-CoV-2属套式病毒目（Nidovirales）冠状病毒科（Coronaviridae）冠状病毒属（Coronavirus）。基因组为线性单股正链的RNA病毒，直径约80～120nm，基因组5′端具有甲基化的帽状结构，3′端具有poly(A)尾，基因组全长约29 kb。膜表面有三种糖蛋白：棘突糖蛋白（S，Spike Protein）、小包膜糖蛋白（E，Envelope Protein）和膜糖蛋白（M，MembraneProtein），其中 S蛋白在识别并结合宿主细胞表面受体，并介导病毒包膜与细胞膜融合的过程中起到关键性作用，也是诱导宿主产生免疫反应，尤其是体液免疫反应的主要抗原。目前已经有许多形式的COVID-19疫苗进入临床试验和正在研制，包括DNA质粒疫苗、腺病毒疫苗、mRNA疫苗和灭活的病毒疫苗等。但是目前为止还没有获得批准的COVID-19疫苗，因此安全有效的预防性COVID-19疫苗的研制是非常有必要的。

复制缺陷型腺病毒载体广泛的应用于疫苗的研制，由于能够诱导产生广泛的体液和细胞免疫反应，宿主范围广，不整合基因组中，高水平表达外源蛋白等优点。但是人群中预存的高水平的针对常见的人腺病毒（Ad5或者Ad2）的免疫反应限制了腺病毒载体的应用。

发明内容

为了解决现有技术的这种预存的免疫反应，本发明提供了一种基于新型腺病毒载体Sad23L和/或Ad49L的新型冠状病毒肺炎COVID-19疫苗。

基于现有的生物技术领域缺乏获得批准的新型冠状病毒肺炎COVID-19疫苗，以及构建有效的疫苗的技术难题，本发明人希望通过优化外源基因使得外源蛋白的表达能够明显提高，同时进一步尝试使用人稀有或者猴的腺病毒作为载体，逃避预存的针对常见腺病毒的免疫反应，本发明获得的新型冠状病毒肺炎COVID-19疫苗能够在动物体内诱导产生高水平的体液和细胞免疫，在动物免疫之后没有发现副作用的出现。本发明新型冠状病毒肺炎COVID-19疫苗是安全有效且可以进行快速大量的制备，因此是可用于预防SARS-CoV-2的感染的候选疫苗株。

本发明所要解决的技术问题通过以下技术方案予以实现：

第一方面，一种表达SARS-CoV-2棘突糖蛋白的核苷酸，所述核苷酸的序列含有如SEQ ID NO:1所示的S蛋白序列。

第二方面，一种含有上述核苷酸的质粒载体。