[发明专利]一种内切木聚糖酶突变体S35F07及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种内切木聚糖酶突变体S35F07及其制备方法和应用，该突变体S35F07具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，与野生酶相比，其在10.0mM的CaCl₂、MgSO₄、ZnSO₄、CoCl₂、NiSO₄、FeCl₃、FeSO₄、EDTA、Pb(CH₃COO)₂、β‑Mercaptoethanol中的活性、在3.0～30.0％(w/v)的NaCl和Na₂SO₄中的活性、在15.0～30.0％(w/v)的NaNO₃中的活性得到了改良。本发明的突变内切木聚糖酶S35F07可应用于高温和/或高盐环境下的食品加工和饲料添加剂等生物技术领域。

技术领域

本发明涉及一种内切木聚糖酶突变体，具体涉及一种内切木聚糖酶突变体S35F07及其制备方法和应用。

背景技术

半纤维素是自然界中仅次于纤维素的异质多聚体，广泛存在于绿色植物细胞壁中。其中，木聚糖在半纤维素中的含量最多，可高达占植物细胞干重的三分之一。内切木聚糖酶能够随机降解由木糖残基通过β-1,4糖苷键连接形成木聚糖主链，生产低聚木糖和/或木糖。因此，木聚糖酶在涉及到半纤维素转化的食品、饲料、造纸、环保及能源等生物技术领域发挥着重要的作用，尤其是在食品和饲料行业中(Chakdar et al.3Biotech,2016,6:150.)。

良好热活性和盐抗性的酶能够在复杂的催化环境影响因素中具有更好的适用性。高温和高盐环境下食品加工或发酵，可以防止微生物的污染、节省灭菌等所消耗的能源；饲料涉及高温制粒过程，作为饲料中的酶制剂需要耐受高温并保持活性(Warden和Williams,Nat Commun,2015,6:10278.)。目前，已知中温木聚糖酶居多，缺乏高浓度盐抗性，在高温和/或高盐环境下酶活力不可逆的丧失。木聚糖酶高温和/或高盐的适应性的不足，限制其在食品和饲料领域的进一步应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种内切木聚糖酶突变体S35F07及其制备方法和应用，该突变体S35F07具有耐高温和高盐的特性，能够对NaCl、Na₂SO₄和NaNO₃具有耐受性，比野生酶rXynAGN16L酶活力高，能够应用于食品和饲料领域。

为了达到上述目的，本发明提供了一种内切木聚糖酶突变体S35F07，该突变体S35F07具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。

本发明的另一目的是提供一种所述的内切木聚糖酶突变体S35F07的编码基因。

优选地，所述编码基因s35f07具有如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。

本发明的另一目的是提供一种包含所述的编码基因s35f07的重组载体。

优选地，所述重组载体采用的表达载体为pEasy-E2。

本发明的另一目的是提供一种包含所述的编码基因s35f07的重组菌。

优选地，所述重组菌采用的菌为大肠杆菌BL21-Gold(DE3)。

本发明的另一目的是提供一种所述的内切木聚糖酶突变体S35F07的制备方法，该方法包含：

将所述的编码基因s35f07和表达载体pEasy-E2相连接，并将连接产物转化大肠杆菌BL21-Gold(DE3)，获得包含编码基因s35f07的重组菌株；培养所述重组菌株，诱导内切木聚糖酶突变体S35F07表达。