[发明专利]用于小鼠脑组织包埋的一种电镜包埋剂

说明书

本发明公开了一种脑组织透射电镜包埋剂的制备方法，属于医学、生物学实验领域，该包埋剂主要是由树脂SPI‑PON­­­­­­812 20‑25份、增塑剂12‑16份、固化剂10‑15份、催化剂0.7‑1.5份组成，依次将树脂SPI‑PON­­­­­­812、增塑剂混合均匀，再加入固化剂搅拌均匀，最后加入催化剂充分搅拌，静置，待气泡消失，呈透明状时，即可使用或收至10ml注射器密封‑20℃保存，备用。该包埋剂有两个特征，第一，显著地减缓了聚合速度，可以在渗透的过程中保持长时间不凝固，确保包埋剂能够充分地渗入脑组织中；第二，可以适当提高包埋剂成型的硬度，给组织一个良好的支撑，利于电镜样品的切片。

技术领域

在本发明涉及医学、生物学实验领域，是一种适用于小鼠脑组织透射电镜的包埋剂。

背景技术

在包埋是通过包埋剂将组织包裹起来，利用包埋剂的特性，为组织提供良好的物理支撑或化学保护作用。

在制作切片或超薄切片时，由于组织是柔软的，或局部的软硬不均，这样制作厚薄均匀的切片是困难的。所以有必要选择合适的包埋剂，浸透组织内部，整个组织一样硬化，以利于切成薄片。

Epon 812环氧树脂曾是电子显微镜最广泛使用的包埋树脂，随着生产Epon 812公司的停产，出现了该树脂的替代品SPI-PON 812树脂包埋剂，SPI-PON 812是一种淡黄色、低粘度的甘油脂族环氧树脂，渗透进组织标本，加入酸苷类和胺类加速剂能很容易地均匀混合，因为SPI-PON 812较低的粘稠性，所以它对脑组织有良好的渗透作用；聚合之后又能给组织一个良好的支撑作用。

发明内容

在本发明的目的在于，提供一种小鼠脑组织的包埋剂，该包埋剂粘稠性较低，渗透性良好，染色以及电子束比较稳定，聚合之后能够对组织起到良好的支撑作用。

一种小鼠脑组织的电镜包埋剂，它是由树脂SPI-PON812、增塑剂甲基内次甲基二甲酸酐、固化剂十二烷基琥珀酸酐，催化剂2，4，6-三（二甲基氨基甲基）苯酚组成。

本发明中的环氧树脂具有环氧基和羟基两个主要化学反应基团，环氧基是线型聚合物的未端，易与其它含活性氢原子的化合物如胺类反应，形成首尾相接的长链状聚合物。而单体中的羟基能与酸酐结合，形成分子间的横桥连接。因此，将环氧树脂、胺类和酸酐三者按比例混合，在定温度条件下，可形成具有三维空间结构的交链状聚合物。这种聚合物收缩率小、均匀，组织损伤小，耐电子束的轰击。包埋后可保存细胞内的超微结构

一种小鼠脑组织的电镜包埋剂，其中按体积份的组分为：树脂SPI-PON812 20-25份、增塑剂12-16份、固化剂10-15份、催化剂0.7-1.5份。

一种小鼠脑组织的电镜包埋剂，其中按体积份的组分为：树脂SPI-PON812 23.0份、增塑剂13.5份、固化剂12.0份、催化剂0.8份。在实际操作中，先将树脂SPI-PON812和增塑剂充分混匀，再加入固化剂充分搅拌，最后再加入催化剂不间断地搅拌直到出现小气泡，停止搅拌，静置，气泡消失呈透明状时，即可使用或收至10ml注射器密封-20℃保存，备用。该包埋剂有两个特征，第一，显著地减缓了聚合速度，可以在渗透的过程中保持长时间不凝固，确保包埋剂能够充分地渗入脑组织中，第二，可以适当提高包埋剂成型的硬度，给组织一个良好的支撑，利于电镜样品的切片。

具体实施方式

以下是本发明的实施例，对本发明技术进行描述，这些实施例仅是本发明一部分，并不代表全部包埋剂的成份。

实施例1