[发明专利]一种大麦条纹病致病性基因pgssk2及其应用

说明书

本发明提供大麦条纹病致病性基因pgssk2及其应用，属于生物技术工程领域，具体提供了一个来源于大麦条纹病菌‑麦类核腔菌的新基因pgssk2。pgssk2基因加强了大麦条纹病病原菌对咪鲜胺的耐受性，通过转pgssk2基因突变体，培育大批量抗咪鲜胺有关杀虫剂和除草剂作物，将提高农业生产。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种大麦条纹病致病基因pgssk2及其调控菌丝生长，渗透压敏感性及抑菌剂耐受性，细胞壁完整性及致病性方面的应用。

背景技术

麦类核腔菌(Pyrenophora graminea)是大麦条纹病的病原菌，主要引起大麦叶部病害，该菌属半知菌亚门真菌(Deuteromycotina)，是一种通过种子传播的病原菌，在受感染的大麦植株中系统性传播，受到感染的大麦植株整株均可发病，防治十分困难。病原真菌通过信号级联放大响应环境变化并调整各个基因表达，病原真菌入侵寄主过程中涉及的信号基因主要包括：异三聚体G蛋白基因、MAP激酶和依赖于cAMP的蛋白激酶基因。在真核生物中，MAP信号通路对多种细胞外信号的反应起着核心作用。其中，在酿酒酵母中，对渗透胁迫作出反应的高渗透压甘油(HOG)通路是最具特征的MAP激酶模块之一，HOG通路的激活受两个膜结合渗透传感器SLN1P和SHOLP的调控，这些蛋白通过该通路的两个独立分支传递信号，它们汇聚在MEPK编码的pbs2p基因中。在高渗胁迫下，sln1不激活，未磷酸化ssk1的积累通过顺序磷酸化激活下游MAP激酶级联(Ssk2/Ssk22-Pbs2-Hog1)，丝状真菌粗糙脉孢菌Hog路径由一个渗透感应组氨酸激酶(OS1)，磷酸转移蛋白组氨酸(HPT1)，两个调控蛋白(RRG1和RRG2)和下游MAPK级联反应(OS5和OS2)分别和Hog1酿酒酵母SSK2/SSK22，Pbs2同源性较高。到目前为止，大麦条纹病菌病原菌的双组份信号系统成员的相关研究尚属空白，本申请主要通过RNAi的方式研究一种大麦条纹病菌mapkk激酶编码的pgssk2基因及其应用，旨在为大麦抗病性育种提供技术支撑。

现有技术存在的问题：现有技术中未见大麦条纹病(麦类核腔菌)pgssk2基因及功能的报道。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明提供了一种大麦条纹病(麦类核腔菌)致病性基因pgssk2，通过RNAi干扰技术获得pgssk2突变体，进一步提供了该基因在调控菌丝生长分化，渗透胁迫，抑菌剂耐受性，细胞壁完整性及致病性等方面的应用。

为了达到上述目的，本发明采用了如下的技术方案：

1.一种大麦条纹病致病性基因pgssk2，该基因全长序列如序列表SEQ ID NO:1所示。

2.一种大麦条纹病致病基因pgssk2基因克隆及其基因功能验证方法，包括如下步骤：

(1)pgssk2基因克隆及序列分析；

(2)pgssk2基因的干扰载体构建；

(3)原生质体制备及载体的遗传转化；

(4)菌丝生长实验；

(6)渗透压敏感性及抑菌剂耐受性实验；

(7)细胞壁完整性实验；

(8)大麦条纹病致病性的测定。

3.一种大麦条纹病致病基因pgssk2基因在调控菌丝生长速率中的应用。

4.一种大麦条纹病致病基因pgssk2基因在调节渗透压及真菌抑制剂敏感性方面的应用。

5.一种大麦条纹病致病基因pgssk2基因在参与细胞壁完整性的应用。

6.一种大麦条纹病致病基因pgssk2在调控大麦条纹病菌致病性方面的应用。