[发明专利]一种多酚类酪氨酸酶抑制剂及其提取方法和应用

说明书

本发明属生物化工技术领域，公开了一种多酚类酪氨酸酶抑制剂，属水解类多酚，该抑制剂的分子结构中含大量的没食子酰基和六羟基二苯甲酰基，且不含有杂环结构，因此较缩合类多酚而言，该抑制剂含有更多的酚羟基和苯环结构，使得其能够通过氢键‑疏水作用力协同作用的方式与更多蛋白质相结合，因而具有更强的酪氨酸酶抑制活性。本发明还提供了该抑制剂的提取方法，是由橡椀为原料，通过有机溶剂萃取、柱分离纯化获得，基于多酚与体积排阻色谱(葡聚糖凝胶)之间的氢键作用力与流动相极性的关系，对橡椀多酚中的大分子物质进行选择性洗脱。此外，本发明还降低了多酚类酪氨酸酶抑制剂生产成本，为橡椀提供了行之有效的高值化利用途径。

技术领域

本发明属于生物化工技术领域，具体涉及一种多酚类酪氨酸酶抑制剂及其提取方法和应用。

背景技术

黑色素是一种生物色素，可以减少紫外线对人体的伤害，其含量与分布决定了皮肤、毛发和眼睛的颜色。然而，当黑色素异常过量地表达时，就会导致人体的局部皮肤过黑及色素沉着，从而产生由于雀斑、黄褐斑、老年斑甚至黑色素瘤，严重影响人们的健康和外貌。酪氨酸酶，又称为多酚氧化酶，广泛的分布于细菌、真菌、植物、动物以及人体中，是一种含铜金属氧化还原酶，属于铜Ⅲ型蛋白酶家族。酪氨酸酶的活性位点含有两个铜离子，铜离子通过N原子分别与三个组氨酸残基相连，外源性的氧分子与之结合成过氧化物，并桥接这两个铜离子中心，构成酪氨酸酶催化氧化反应活性中心。酪氨酸酶是黑色素合成的关键限速酶，在酪氨酸代谢生成黑色素的整个生化反应过程中起到决定性作用。

开发酪氨酸酶抑制剂，不仅可以为治疗色素沉着过度、黑色素瘤等疾病提供药物基础，也可以为美白类化妆品、护肤品等高附加值日化用品提供。目前最常用的酪氨酸酶抑制剂主要以熊果苷、曲酸、没食子酸、对苯二酚等分子量小于500Da的化合物为主。除此以外，从植物中提取并分离获得的其它物质，也是酪氨酸酶抑制剂的主要来源，包括鞣花酸、儿茶素、槲皮素、大豆异黄酮等。但由于其安全性、有效性和生产成本等现实问题，目前仅有少部分酚类抑制剂在实际生产中使用。而寻找绿色安全、来源丰富、高效价廉的酪氨酸酶抑制剂，是目前的药品、化妆品生产企业的迫切需求。

同时，橡树是壳斗科栋属乔木的一种，我国暖温带落叶阔叶林和亚热带常绿阔叶林的主要树种之一，是家具、地板、工业用木料的优质原材料，我国拥有大量的橡木资源。橡椀(Valonea)橡树果实的外壳，橡椀壳中富含水解类多酚，是一种含量丰富的林化产品。通过传统的热水萃取法可得到纯度为77.64％，重量占橡椀果壳干重28.45％的橡椀多酚。但由于缺乏资源化利用技术，橡椀属于橡树木材加工副产物，除了作为焚烧材料、制作制革用栲胶外，至今无其它有效利用途径。

发明内容

本发明提出一种多酚类酪氨酸酶抑制剂及其提取方法和应用，以解决现有技术中存在的一个或多个技术问题，至少提供一种有益的选择或创造条件。

为了克服上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种多酚类酪氨酸酶抑制剂，结构式为式(1)或式(1)的衍生物：

其中，n₁、n₂、n₃均为正整数，且满足n₁、n₂、n₃的三者之和为21至56。

在植物次生代谢产生的众多化合物中，酚类物质是十分重要的一类，其含量仅次于纤维素、半纤维素和木质素。其中多酚是多羟基酚类物质的简称，通常特指分子量大于500Da的聚合物。按照化学结构特点，多酚主要分为两大类，包括水解类多酚和缩合类多酚。缩合类多酚以黄椀-3-醇为结构单元(包括儿茶素、表儿茶素、棓儿茶素、表棓儿茶素、阿福豆素、表阿福豆素等)，结构单元间通过C-C键相互连接，自然界中含量最大的缩合类多酚为原花青定和原翠雀定。水解类多酚则以没食子酸或鞣花酸为结构单元，单元间通过糖苷键和酯键相互连接形成，最具代表性的水解类多酚为单宁酸。