[发明专利]一种新型冠状病毒刺突蛋白、相关生物材料及其应用、检测试纸和检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种高稳定性新型冠状病毒刺突蛋白、相关生物材料及其应用、检测试纸和检测试剂盒，涉及生物技术和生物医药领域，本发明是通过对新冠病毒表面的最佳抗原刺突蛋白，即S蛋白的内部交联改造，突破业界瓶颈，在哺乳动物中表达并纯化获得高稳定性的全长S蛋白三聚体，最大限度地保留新冠病毒表面刺突蛋白的所有抗原表位，并以此稳定S蛋白为抗原捕获病人样本中的新冠病毒抗体，制作准确度高，灵敏度高，稳定性高的新型冠状病毒抗体即时检测试剂盒。

技术领域

本发明涉及生物技术及生物医药领域，尤其涉及一种新型冠状病毒刺突蛋白、相关生物材料及其应用、检测试纸和检测试剂盒，涉及基于内部交联的稳定态S蛋白新型冠状病毒抗体定量即时检测试剂盒，具体地说是应用新冠病毒表面最佳抗原稳定态全长S蛋白、胶体金和纳米磁微粒技术，实现对血液中抗新型冠状病毒S蛋白IgM抗体和（或）IgG抗体进行即时检测的试纸和试剂盒。

背景技术

新型冠状肺炎（COVID-19）是由新型冠状病毒（SARS-CoV-2）感染引起的传染病。

新型冠状病毒传播性强，潜伏期长，对人群普遍易感。新型冠状肺炎患者以发热、乏力、干咳为主要表现，严重者可致死。部分患者并无症状，隐蔽性高。由于疫情发展迅速且无特效药和疫苗，早期诊断成为疫情防控的关键。

核酸检测虽是疑似患者确诊的“金标准”，但其技术壁垒高、耗时长且假阴性率高，因而核酸单项检测不能满足疫情期间对疑似病例快速筛查的要求。血清学特异性抗体检测是诊断病毒感染的另一关键证据，该手段通过SARS-CoV-2抗原对血清中特异性抗体（IgM或者IgG）的存在及含量进行检测，来间接判断病毒的感染情况。抗体检测采用静脉血取样，相较与核酸检测的取样更加稳定。目前针对SARS-CoV-2的抗体检测主要有刺突蛋白（S蛋白）和核衣壳蛋白（N）蛋白两种抗原，其中病毒表面的刺突蛋白（S蛋白）承担病毒与宿主细胞膜受体结合及膜融合功能。不同冠状病毒S蛋白彼此之间同源性低，特异性强，因此S蛋白是开发免疫诊断产品的首选抗原。然而由于S蛋白提纯后稳定性较差，无法长期保存，因此目前市面上开发的免疫学检测试剂均采用N蛋白或者S蛋白的一部分（例如受体结合区域RBD）。这些试剂无法完整的表征病毒表面的抗原特性，同时无法保证抗原蛋白在试剂盒储备中的稳定性，存在特异性差和假阳性高等诸多问题，无法满足大规模排查疑似病例和无症状患者的疫情防控要求。

针对上述问题，特提出本发明，通过中科院武汉病毒所公布的2019新型冠状病毒基因组序列中刺突蛋白编码序列的基础上，在新型冠状病毒表面S蛋白内部构建二硫键形式的交联位点，移除S蛋白内部剪切位点；通过在N端插入分泌信号肽，在C段插入酶切位点、聚合信号肽以及亲和纯化标签，在哺乳动物细胞中实现S蛋白三聚体的高产量分泌表达，解决产业化难题。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种新型冠状病毒刺突蛋白、相关生物材料及其应用、检测试纸和检测试剂盒。

本发明的第一目的在于提供一种SARS-CoV-2高特异性抗原。

本发明的第二目的在于提供一种胶体金捕获法检测SARS-CoV-2抗体的检测试纸或试剂盒。

本发明的第三目的在于提供一种胶体金间接法检测SARS-CoV-2抗体的检测试纸或试剂盒。

本发明的第四目的在于提供一种胶体金双抗原夹心法检测SARS-CoV-2抗体的检测试纸或试剂盒。

本发明的第五目的在于提供一种纳米磁微粒捕获法检测SARS-CoV-2抗体的检测试纸或试剂盒。

为了达到上述目的，本发明的技术方案如下：