[发明专利]P.indica厚垣孢子、P.indica孢子菌剂及其制备方法

说明书

本发明属现代农业领域。P.indica厚垣孢子，其特征是，所述P.indica厚垣孢子如下发酵方法获得：培养基接种P.indica摇瓶培养72h获得培养液，按体积比1:10接种到灭菌的发酵罐中，继续培养96h后，加入0.3‑0.5wt％的Ca(OH)₂培养48h，诱导产生厚垣孢子。P.indica孢子菌剂，其有效成分为P.indica厚垣孢子。本发明还公开了上述P.indica孢子菌剂的制备方法。本发明制备的P.indica孢子菌剂可以在作物根际定殖共生，促进农作物的生长，提高作物产量。

技术领域

本发明属现代农业领域，涉及一种用于促生作物生长的植物内生真菌Piriformospora indica孢子菌剂及其制备方法。

背景技术

P.indica是印度科学家最早从塔尔沙漠中灌木根际分离获得的植物根际内生真菌，是目前唯一鉴定的担子菌门、层菌纲、梨形孢属的一个种。P.indica菌丝定殖于植物根系表面、表皮细孢和细孢间隙，并形成典型的梨形厚垣孢子，长期定殖存活在作物根系。P.indica寄主范围广泛，可以与150多种单子叶植物、双子叶植物共生，通过促进植物对氮、磷等营养物质的吸收，诱导植物产生系统抗性，在促进植物生长、提高产量的同时，增强植物的系统抗病、抗旱、耐盐能力，是一种具有广泛开发潜力的抗病、增效多功能植物内生真菌。番茄接种定殖P.indica，生物量增加了19-28％，坐果率增加了15％；大麦经P.indica处理不仅产量提高，而且增强了植物抵抗镰刀菌等病原菌的侵染能力。2019年沙特阿拉伯阿卜杜拉国王大学研究报道，P.indica通过诱导活性氧(ROS)清除系统和调节N⁺/K⁺离子平衡保护植物免受盐胁迫侵害，使番茄产量提高了56％，Science发表专题评论认为是提高产量、改良土壤盐碱化的有效方法。

P.indica是重要的农业微生物资源。但当前国内外对P.indica等植物内生菌研究主要集中在该菌对植物抗病、促生作用及相关机理方面，应用研究相对滞后。P.indica是一种可在人工培养基上完成纯培养的内生植物真菌。现有对P.indica的研究主要集中在P.indica菌丝上。由于菌丝是营养增殖体，对环境条件敏感，生长不适宜条件下菌丝容易衰败死亡，导致腐生细菌繁殖，影响产品质量和货架期，而且，实际使用过程中经常面临高温、干旱、光照、土壤酸碱度等多种逆境因素，影响产品的推广应用价值。

公开号CN104541668A、2016年6月22日的中国发明专利申请说明书公开了一种提高烟草漂浮育苗种子发芽率和壮苗的方法，是将用液体培养基培养的植物根内生真菌印度梨形孢的菌体和培养滤液与烟草育苗基质混匀，利用印度梨形孢的菌体及其释放在培养滤液中的物质提高烟草漂浮育苗的种子发芽率并促进烟苗生长和抗逆；具体包括以下步骤：(1)用人工液体培养基培养印度梨形孢，获得菌液；菌液包括菌体和培养滤液，菌体包括印度梨形孢菌丝和孢子；(2)将前述菌液与烟草育苗基质(以下简称基质)混匀得到菌液基质混合物；(3)将菌液基质混合物装入聚苯乙烯格盘后播种烟草，或者，按常规方法播种烟草后覆盖一薄层菌液基质混合物；(4)按常规方法进行漂浮育苗、炼苗和移栽。上述方法主要利用了菌体菌丝，无法解决菌丝易衰败死亡，导致腐生细菌繁殖的技术问题。

公开号CN105766492A、公开日2016年7月20日的中国发明专利申请说明书公开了一种利用印度梨形孢和聚六亚甲基双胍盐酸盐联合防治烟草青枯病的方法，包括以下步骤：(1)将烟草种子播种于混有印度梨形孢(Piriformospora india)菌丝的育苗基质中，成苗后移栽至大田；(2)移栽前，用聚六亚甲基双胍盐酸盐药液浇灌烟草苗移栽用洞穴；移栽后10-15天，再用聚六亚甲基双胍盐酸盐药液对每株烟草植株进行灌根处理。上述方法主要利用了菌体菌丝，无法解决菌丝易衰败死亡，导致腐生细菌繁殖的技术问题。

公开号CN105850535A、公开日2016年8月17日的中国发明专利申请说明书公开了一种一种提高蒺藜苜蓿抗盐害能力的方法，利用在蒺藜苜蓿根部寄生印度梨形孢来提高蒺藜苜蓿耐盐性的方法，其主要利用了菌体菌丝，无法解决菌丝易衰败死亡，导致腐生细菌繁殖的技术问题。