[发明专利]干细胞提取液及其制备方法与应用在审
申请号: | 202010682500.3 | 申请日: | 2020-07-15 |
公开(公告)号: | CN111759866A | 公开(公告)日: | 2020-10-13 |
发明(设计)人: | 董健伸;徐汝强;孙永沛;程洪斌;王晓东;徐俊 | 申请(专利权)人: | 博品(上海)生物医药科技有限公司 |
主分类号: | A61K35/51 | 分类号: | A61K35/51;A61P29/00;C12N5/0775 |
代理公司: | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人: | 孙周强 |
地址: | 200438 上海市杨*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 干细胞 提取 及其 制备 方法 应用 | ||
1.干细胞提取液,其特征在于,所述干细胞提取液的制备方法包括以下步骤:将原代干细胞接种于培养基中,原代培养,隔天换液,当原代干细胞生长至80~90%时,去除培养基,剩余的干细胞经过漂洗后与生理盐水混合,诱导培养后进行离心分离,得到上清液;然后将上清液过滤后,得到干细胞提取液。
2.根据权利要求1所述干细胞提取液,其特征在于,干细胞为人类脐带间充质干细胞。
3.根据权利要求1所述干细胞提取液,其特征在于,原代干细胞接种于培养基中的密度为105~107个/ T150瓶;培养基为无血清MSC培养基。
4.根据权利要求1所述干细胞提取液,其特征在于,利用生理盐水漂洗。
5.根据权利要求1所述干细胞提取液,其特征在于,诱导培养在37℃、5%CO2的培养箱中进行;诱导培养的时间为48~96小时。
6.根据权利要求1所述干细胞提取液,其特征在于,离心分离为1500rpm离心10分钟;过滤的滤膜为0.1微米。
7.根据权利要求1所述干细胞提取液,其特征在于,诱导培养时,生理盐水用量为20~30mL/T150瓶。
8.根据权利要求1所述干细胞提取液,其特征在于,诱导培养时,加入维生素E。
9.干细胞提取液的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将原代干细胞接种于培养基中,原代培养,隔天换液,当原代干细胞生长至80~90%时,去除培养基,剩余的干细胞经过漂洗后与生理盐水混合,诱导培养后进行离心分离,得到上清液;然后将上清液过滤后,得到干细胞提取液。
10.权利要求1所述干细胞提取液在制备药物中的应用。
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