[发明专利]一种a-地中海贫血基因检测试剂盒及使用方法

说明书

本发明提供一种a‑地中海贫血基因检测试剂盒，用于α地贫中的3种缺失型‑‑SEA、‑α3.7、‑α4.2，‑α3.7三种亚型及三种点突变非缺失型αCSα、αQSα和αWestmeadα基因的联合检测，包括针对3种缺失型‑‑SEA、‑α3.7三种亚型、‑α4.2，及三种点突变非缺失型αCSα、αQSα和αWestmeadα设计的引物对、探针和抑制剂，还包括PCR反应液、阳性质控品、阴性质控品。本发明还提供了一种a‑地中海贫血基因检测试剂盒的使用方法。解决了基因检测试剂盒检测周期长、操作复杂、成本高和特异性不强等问题。

技术领域

本发明应用于基因检测技术领域，具体涉及一种a-地中海贫血基因检测试剂盒及使用方法。

背景技术

地中海贫血简称“地贫”，又称海洋性贫血、珠蛋白合成障碍性贫血，因最早发现于地中海沿岸国家而得名，是一种遗传性溶血性贫血病，此病在全球范围内广泛分布，在我国南方地区较为高发，其病因是珠蛋白基因的缺失或突变导致珠蛋白链的合成障碍。地中海贫血患者轻者会出现贫血，较为严重的患儿可能在青少年时期因并发症死亡，最为严重的患儿可能于宫内死亡，还会导致孕妇发生妊高症、产时和产后大出血、胎盘过早剥落等危重并发症。在当前此病仍然没有理想的治疗方法，因此做好预防和监控对控制和降低地中海贫血的发病率非常重要，在孕期进行地贫筛查，减少重症地贫胎儿的出生，对优生优育、降低地贫发病率有重要作用。

根据血红蛋白中珠蛋白肽链受损的不同，地贫主要分为α地贫和β地贫两大类。我国广东、广西及海南是该疾病的高发区，其中广西人群的地贫基因携带率最高，高达25％。在广西人群中，导致α地贫的α珠蛋白基因簇变异在人群中的携带率高达17％。由于重度α地贫会导致血红蛋白Barts胎儿水肿综合征，中间型α地贫会导致血红蛋白H病。最常见α地贫缺失类型是--^SEA，其次为-α^4.2和-α^3.7；常见的突变类型是α^CSα、α^QSα和α^Westmeadα。

目前地贫缺失型基因检测的技术多为Gap-PCR法，地贫点突变基因检测的技术多为Sanger法，无法同时对缺失型和非缺失型进行检测，且操作繁琐，检测周期长，无法进行多位点同时检测，亟待开发简单快捷的a-地中海贫血基因检测方法。

发明内容

本发明针对现有技术中存在的a-地中海贫血基因检测时对样本检测周期长、操作复杂、成本高和特异性不强等问题，提供一种a-地中海贫血基因检测试剂盒及使用方法。本试剂盒具有高灵敏度、低成本、高特异性、操作简便、检测周期短等特点，可以快速精准的对地中海贫血相关基因进行检测。

本发明解决其技术问题是采用以下技术方案实现的：

一种a-地中海贫血基因检测试剂盒，用于α地贫中的3种缺失型--^SEA、-α^3.7、-α^4.2，-α^3.7三种亚型及三种点突变非缺失型α^CSα、α^QSα和α^Westmeadα基因的联合检测，包括针对3种缺失型--^SEA、-α^3.7三种亚型、-α^4.2，及三种点突变非缺失型α^CSα、α^QSα和α^Westmeadα设计的引物对、探针和抑制剂，还包括PCR反应液、阳性质控品、阴性质控品。

进一步的，所述引物对、探针序列如下：

用于检测--^SEA(I/D)引物对、探针：

SEA-F:ATGGATGAGGACGGAGCGATCTGG

SEA-DR:TACTGCAGCCTTGAACTCCTGGA