[发明专利]一种提高DNA编码化合物库纯度的方法在审

专利信息
申请号: 202010685588.4 申请日: 2020-07-17
公开(公告)号: CN113943726A 公开(公告)日: 2022-01-18
发明(设计)人: 李进;常咏;王钊;阙嘉敏;叶伟;高志君;李萍;高雅;樊晶;万金桥 申请(专利权)人: 成都先导药物开发股份有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 610200 四川省成都市双*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 一种 提高 dna 编码 化合物 纯度 方法
【权利要求书】:

1.一种提高DNA编码化合物库纯度的方法,其特征在于:包括以下步骤:

(1)向DNA编码化合物库中加入缓冲溶液,将溶液浓度稀释至0.5~3.0μg/μL;

(2)向步骤(1)溶液中加入羧基磁珠溶液,混合均匀后放置5~30分钟;使DNA编码化合物库中的目的DNA片段与羧基磁珠结合,杂质DNA片段保留于溶液中;

(3)利用磁场作用使羧基磁珠沉降,吸出上清液;

(4)对羧基磁珠进行洗涤,洗涤完成后再利用磁场作用使羧基磁珠沉降,吸出上清液;

(5)再向步骤(4)中加入洗脱液,使所有羧基磁珠均匀重悬,室温放置5~30分钟;再利用磁场作用,直至羧基磁珠全部沉降,收集上清液,即目的DNA片段。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中所述的缓冲溶液为浓度10mM的Tris缓冲盐溶液,pH为7.0~8.0。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)中所述的目的DNA片段的长度为80~150个碱基。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)中所述的羧基磁珠浓度为0.8~1.2mg/mL,加入量为步骤(1)溶液体积的1.2~2.4倍。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(4)中对羧基磁珠进行洗涤,具体洗涤步骤为:向步骤(3)中加入2~4倍的步骤(1)溶液体积、浓度为70%~80%的乙醇对羧基磁珠进行洗涤。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:重复步骤(4)1~2次,洗涤完成后将乙醇吸干。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(5)中所述洗脱液为浓度10mM的Tris缓冲盐溶液,其pH为7.0~8.0,加入量为步骤(1)中溶液体积的0.8~1.2倍。

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