[发明专利]一种提高DNA编码化合物库纯度的方法在审
申请号: | 202010685588.4 | 申请日: | 2020-07-17 |
公开(公告)号: | CN113943726A | 公开(公告)日: | 2022-01-18 |
发明(设计)人: | 李进;常咏;王钊;阙嘉敏;叶伟;高志君;李萍;高雅;樊晶;万金桥 | 申请(专利权)人: | 成都先导药物开发股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
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地址: | 610200 四川省成都市双*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 dna 编码 化合物 纯度 方法 | ||
1.一种提高DNA编码化合物库纯度的方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)向DNA编码化合物库中加入缓冲溶液,将溶液浓度稀释至0.5~3.0μg/μL;
(2)向步骤(1)溶液中加入羧基磁珠溶液,混合均匀后放置5~30分钟;使DNA编码化合物库中的目的DNA片段与羧基磁珠结合,杂质DNA片段保留于溶液中;
(3)利用磁场作用使羧基磁珠沉降,吸出上清液;
(4)对羧基磁珠进行洗涤,洗涤完成后再利用磁场作用使羧基磁珠沉降,吸出上清液;
(5)再向步骤(4)中加入洗脱液,使所有羧基磁珠均匀重悬,室温放置5~30分钟;再利用磁场作用,直至羧基磁珠全部沉降,收集上清液,即目的DNA片段。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中所述的缓冲溶液为浓度10mM的Tris缓冲盐溶液,pH为7.0~8.0。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)中所述的目的DNA片段的长度为80~150个碱基。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)中所述的羧基磁珠浓度为0.8~1.2mg/mL,加入量为步骤(1)溶液体积的1.2~2.4倍。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(4)中对羧基磁珠进行洗涤,具体洗涤步骤为:向步骤(3)中加入2~4倍的步骤(1)溶液体积、浓度为70%~80%的乙醇对羧基磁珠进行洗涤。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:重复步骤(4)1~2次,洗涤完成后将乙醇吸干。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(5)中所述洗脱液为浓度10mM的Tris缓冲盐溶液,其pH为7.0~8.0,加入量为步骤(1)中溶液体积的0.8~1.2倍。
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