[发明专利]一种卵形鲳鲹全同胞家系的构建方法

说明书

本发明属于生物遗传育种技术领域，尤其涉及一种卵形鲳鲹全同胞家系的构建方法；通过亲鱼的选择与培育，亲鱼锻炼，亲鱼的标记，亲鱼催产，交配亲鱼筛选，亲鱼配对及新群体的构建，取鱼取卵，受精卵孵化实现卵形鲳鲹全同胞家系的构建；本发明可以准确判断追尾亲鱼性别，追尾的两条鱼，在前面游的为雌鱼，后面追逐的为雄鱼，可以获得遗传背景清晰的全同胞家系，而目前尚未见有获得卵形鲳鲹全同胞家系的报道；采用本发明，配对成功率可达90％以上，可以一次获得多个全同胞家系，可以为卵形鲳鲹家系选育及遗传图谱构建等提供材料，并且可以为卵形鲳鲹的家系选育提供技术支撑，对卵形鲳鲹产业的发展具有重要的意义。

技术领域

本发明属于生物遗传育种技术领域，尤其涉及一种卵形鲳鲹全同胞家系的构建方法。

背景技术

目前，最接近的现有技术：卵形鲳鲹又称金鲳鱼，暖水性中上层鱼类，具有洄游和群居习性，主要分布于印度洋、太平洋、大西洋，以及非洲沿岸的热带和亚热带水域，在我国南海、东海和黄海均有分布。卵形鲳鲹属于高蛋白低脂肪鱼类，富含多种蛋白质及其它营养成分，历来被列为名贵食用鱼类。该鱼具有生长速度快、食性简单、饲料转化率高的特点，使其成为我国近、远海集约化养殖的良好选择。

随着养殖技术的不断成熟，卵形鲳鲹产业的发展迅速，但由于落后的选育技术以及不规范的选择方法，卵形鲳鲹种质退化现象较为严重。因此，采用现代遗传育种技术，进行种质发掘与创新势在必行。目前水产动物中常规的选育方法主要有群体选育和家系选育。

群体选育是水产动物常用的育种方法之一，可短期内获得较理想的个体，但该方法对性状的选择更多的是基于表型判断，由于不能有效使用系谱，极易造成群体近交衰退。而基于数量遗传学的家系选育技术则在优良品种的选择，近交衰退的控制等方面具有突出的优势，是目前水产育种主流技术。而家系的构建是进行水产动物家系选育的基本要求。目前水产动物的家系构建，主要有以下两种方法：

1、人工催产授精法。当雌雄鱼性成熟时，对雌雄鱼进行人工催产，获得成熟雄鱼的精液和成熟雌鱼的卵子，利用1尾雄鱼的精液和1尾雌鱼的卵子进行干法授精、半干法授精，或湿法授精，获得受精卵，将受精卵进行孵化、培育，获得全同胞家系。该方法操作步骤少，但技术要求较高，而且要求雌雄鱼精液及卵子较容易挤出。

2、一对一配对繁殖法。选择性成熟的雌雄亲鱼，进行人工催产(部分鱼不需要进行人工催产)，将1尾雄鱼和1尾雌鱼放置到一个水池或网箱，亲鱼自行完成交配受精，待受精卵孵化后即可获得一个全同胞家系。该方法操作十分简单，但要求雌雄鱼性别清楚，而且两尾鱼在一个独立的环境下仍可以完成交配受精。

目前卵形鲳鲹的繁育一般是对一个小群体进行人工催产，然后将其放置到一个网箱，使其部分雄鱼与雌鱼发生追尾、交配、产卵，进而孵化获得子代群体，但该方法获得的子代无法区分其父母本，也无法对不同的全同胞家系进行区分。

在生产中，要获得遗传背景清楚的卵形鲳鲹全同胞家系十分困难，获得大量全同胞家系尤为困难。一是人工催产授精比较困难。卵形鲳鲹腹壁较厚而且较硬，通过挤压腹部挤出精液或卵子十分困难，即使在繁殖季节或催产后，用手挤压亲鱼的腹部也难以挤出精液和卵子，因此，在不损伤亲鱼的情况下，采用常规方法将精子与卵子挤出，然后进行人工授精获得全同胞家系十分困难。二是性别难以判断。成年雌雄卵形鲳鲹体型规格相似，生殖孔也极其相似，从体型及生殖孔难以鉴别性别。在繁殖季节，雌雄卵形鲳鲹的性别特征差异也不明显，通过挤压腹部获得精子或卵子来判断性别也十分困难。在不了解性别的情况下，将任意两尾亲鱼放在一起交配，往往也由于部分配对个体性别相同而无法获得全同胞家系。三是一对一配对繁殖获得全同胞家系十分困难。卵形鲳鲹具有群游习性，交配繁殖需要经过追尾、排卵、受精等一系列过程，雄鱼会在群体中选择合适的雌鱼进行追尾，进而排卵受精。而传统的一对一配对方式，将雌雄亲鱼单独放置于水池或网箱，亲鱼一般不会发生追尾，已有的追尾行为也会因为无群游环境而停止追尾交配，难以构建全同胞家系。

综上所述，现有技术存在的问题是：