[发明专利]一种多糖吸收的定量方法

说明书

本发明公开了一种多糖吸收的定量方法。该方法包括动物小肠模型的建立，以及单糖峰面积与多糖浓度换算等步骤。本发明通过建立动物小肠模型，结合多糖水解后的单糖的色谱图峰面积与多糖浓度的回归方程，实现了多糖吸收的定量，解决了传统的同位素标记和荧光标记方法操作复杂，实验成本高，实验试剂有害的问题，对于多糖的吸收动力学的研究十分重要。

技术领域

本发明涉及多糖吸收领域，具体涉及一种多糖吸收的定量方法。

背景技术

现代科技水平不断发展，人们的生活质量也在不断改善，人们对于疾病的治愈、体质的改善等愈加重视，目前，针对这些需求大部分还是采用西药，但西药大多存在一定副作用，刺激性强，因此，多糖进入了人们的视野。多糖是由多种单糖经脱水缩合形成的大分子化合物，可在自然界的生物上直接提取得到，其来源广泛，治疗效果或体质改善效果更温和，人们对多糖的研究也因此越来越多，而除了药理的研究外，其吸收动力学的研究也十分重要，这直接关系到生物体对于多糖的具体吸收情况。

目前，研究多糖的吸收主要是采用同位素标记或者荧光标记的方法，从而进行定量，但无论是同位素标记还是荧光标记，其操作都十分复杂，普通的实验室较难完成，另外，这两种方法使用的试剂也会对实验对象产生一定的伤害。

发明内容

为了解决上述的技术问题，本发明提出了一种多糖吸收的定量方法，包括以下步骤：

步骤一、为动物对象的小肠搭建外部循环通道，外部循环通道包括2根导管、浓度为A的灌流液、泵，2根导管一端均连通小肠，另一端均插入浓度为A的灌流液中，由泵驱动灌流液在小肠和导管中实现循环流动；所述灌流液为多糖溶液；

步骤二、根据实验者需要，取循环流动后一定时间的一定量的灌流液作为样品溶液，将样品溶液水解后进行色谱检测，采集含量最高的单糖的峰面积，代入回归方程中计算样品溶液的浓度，记为B，根据A和B即可计算得到小肠吸收的多糖的质量，实现多糖吸收的定量；

所述回归方程的制作方法为：取梯度浓度的灌流液，分别进行水解后进行色谱检测，选取含量最高的单糖的峰面积为因变量，对应的灌流液的浓度为自变量，得到所述回归方程。

其中，上述多糖溶液至少可以为玉屏风多糖溶液、黄芪多糖、防风多糖和白术多糖中的一种；上述动物对象至少可以为鸡。

在步骤一中，搭建外部循环通道的过程为：对动物对象进行麻醉，打开动物对象腹腔，取出小肠，在胃部处或胃部往下1～4cm处开一个开口，在回盲口处或回盲口往上1～3cm处开一个开口，分别插入导管，导管的另一端分别插入浓度为A的灌流液中。

在步骤一中，在未插入的导管另一端分别插入浓度为A的灌流液中之前，先将未插入的导管另一端插入生理盐水中，通过泵实现循环流动以冲洗肠道。

在上述过程中，灌流液的温度始终保持与动物对象的内环境温度相同。

在上述过程中，控制泵保持4～6mL/min的速度8～12min，然后控制泵保持2～3mL/min的速度。

本发明的有益效果为：本发明通过建立动物小肠模型，结合多糖水解后的单糖的色谱图峰面积与多糖浓度的回归方程，实现了多糖吸收的定量，解决了传统的同位素标记和荧光标记方法操作复杂，实验成本高，实验试剂有害的问题，对于多糖的吸收动力学的研究十分重要。

附图说明

图1为本发明的定量方法的工作示意图。

具体实施方式

以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整的描述，以充分地理解本发明的目的、方案和效果。需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

实施例1：