[发明专利]筛选结合抑制剂和/或结合区域的方法在审
| 申请号： | 202010691682.0 | 申请日： | 2020-07-17 |
| 公开（公告）号： | CN113461809A | 公开（公告）日： | 2021-10-01 |
| 发明（设计）人： | 徐晓昱;朱婷婷 | 申请（专利权）人： | 南京诺唯赞生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/10 | 分类号： | C07K16/10;G01N33/569 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 赵颖 |
| 地址： | 210033 江苏省南京市南京经济*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 筛选 结合 抑制剂 区域 方法 | ||
1.一种高通量筛选抑制SARS-COV-2的RBD与ACE-2结合的抑制剂的方法，其包括以下的步骤：
a)获得带有第一标签的第一结合区域，以及带有第二标签的第二结合区域，其中，所述第一标签和所述第二标签分别对应地包含选自下组的标签：供体标签和受体标签，
其中所述供体标签和所述受体标签相互作用时，所述受体标签可获得转移自所述供体标签的能量而产生荧光；
b)获得带有第三标签的第三蛋白质，以及带有第四标签的第四蛋白质，其中所述第三蛋白质和所述第四蛋白质任意地分别选自下组：SARS-COV-2的RBD和ACE-2，其中，所述第三标签可以与所述第一结合区域特异性结合，所述第四标签可以与所述第二结合区域特异性结合；
c)将候选的所述抑制剂与所述带有第一标签的第一结合区域、所述带有第二标签的第二结合区域、所述带有第三标签的第三蛋白质以及所述带有第四标签的第四蛋白质混合；
d)检测所述混合后所述受体标签和所述供体标签的荧光的波长处吸光度的比值。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第三蛋白质为SARS-COV-2的RBD，且所述第四蛋白质为ACE-2；或者，所述第三蛋白质为ACE-2，且所述第四蛋白质为SARS-COV-2的RBD。
3.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中所述SARS-COV-2的RBD的浓度为约3-120nM。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述SARS-COV-2的RBD的浓度为约5-60nM。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述ACE-2的浓度为约1-60nM。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述ACE-2的浓度为约2-30nM。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述第一标签为所述供体标签，且所述第二标签为所述受体标签；或者，所述第一标签为所述受体标签，且所述第二标签为所述供体标签。
8.一种高通量筛选特异性结合SARS-COV-2的RBD的结合区域的方法，其包括以下的步骤：
a)获得带有第一标签的第一结合区域，以及带有第二标签的第二结合区域，其中，所述第一标签和所述第二标签分别对应地包含选自下组的标签：供体标签和受体标签，
其中所述供体标签和所述受体标签相互作用时，所述受体标签可获得转移自所述供体标签的能量而产生荧光；
b)获得带有第三标签的SARS-COV-2的RBD，其中，所述第三标签可以与所述第一结合区域特异性结合，所述第二结合区域可以与SARS-COV-2的RBD特异性结合；
c)将候选的所述结合区域与所述带有第一标签的第一结合区域、所述带有第二标签的第二结合区域、所述带有第三标签的SARS-COV-2的RBD混合；
d)检测所述混合后所述受体标签和所述供体标签的荧光波长处吸光度的比值。
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述SARS-COV-2的RBD的浓度为约0.5-60nM。
10.根据权利要求8-9中任一项所述的方法，其中所述SARS-COV-2的RBD的浓度为约3-10nM。
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