[发明专利]小檗碱作为制备降低肝糖异生药物的用途

说明书

本发明涉及一种小檗碱作为制备降低肝糖异生药物的用途。本发明证实了小檗碱可以抑制肝脏Ppp1r3c基因表达，进而抑制cAMP刺激的TORC2去磷酸化水平和转位入核，从而降低肝糖异生，为小檗碱作为制备降低肝糖异生药物提供了理论依据。

技术领域

本发明属于2型糖尿病领域，特别涉及一种小檗碱作为制备降低肝糖异生药物的用途。

背景技术

小檗碱是中药黄连含有的主要成分之一，俗称黄连素。黄连用于治疗糖尿病已有一千多年的历史，小檗碱也因具有明显的降糖减脂作用而被应用于治疗2型糖尿病。小檗碱对糖代谢的调节主要体现在以下几个方面，如改善胰岛素抵抗，促进胰岛素分泌，促进外周组织糖酵解，调节肠道菌群，减少肠道对葡萄糖的吸收以及调节脂质代谢。目前关于小檗碱抑制肝糖异生的研究仍较少，Xuan X等于2011年首次报道小檗碱可以通过降低糖尿病大鼠的肝脏FOXO1的基因和蛋白表达，进而抑制糖异生关键酶基因Pck1和G6pc的表达，抑制肝脏葡萄糖产生。此外，小檗碱可以通过抑制肝脏HNF4表达进而抑制糖异生关键酶基因表达。然而，其抑制糖异生的机制远未清楚。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为小檗碱作为制备降低肝糖异生药物提供理论依据。

本发明提供了一种小檗碱作为制备降低肝糖异生药物的用途。

所述小檗碱抑制cAMP刺激的肝脏Ppp1r3表达。

优选的，所述小檗碱配以药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成制剂使用。

优选的，所述制剂选自片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、缓释剂中的一种。

本发明利用8-Br-cAMP刺激小鼠肝原代细胞建立了离体糖异生模型，筛选出Ppp1r3c为小檗碱抑制肝糖异生的可能靶基因。为了进一步探讨Ppp1r3c对糖异生的调节作用及其在小檗碱抑制肝糖异生中发挥的作用，研究Ppp1r3c调节小鼠肝原代细胞TORC2磷酸化及核转位，旨在明确肝脏表达的Ppp1r3c在肝糖异生过程中的调控作用和小檗碱调节肝糖异生的机制。

有益效果

本发明证实了小檗碱可以抑制肝脏Ppp1r3c基因表达，进而抑制cAMP刺激的TORC2去磷酸化水平和转位入核，从而降低肝糖异生，为小檗碱作为制备降低肝糖异生药物提供了理论依据。

附图说明

图1为小檗碱抑制cAMP刺激的小鼠肝脏原代细胞葡萄糖产生；

图2为小檗碱抑制cAMP刺激的小鼠肝脏原代细胞糖异生关键酶基因表达；

图3为荧光实时定量PCR检测Ppp1r3c基因表达；

图4为利用葡萄糖氧化酶法检测cAMP刺激的小鼠肝原代细胞葡萄糖生成水平；

图5为Ppp1r3c过表达对小鼠肝原代细胞葡萄糖生成的影响；

图6为小鼠肝原代细胞贴壁24h后，使用100μmol/L 8-Br-cAMP联用2.5μmol/LBerbrine共同处理2h，收集蛋白，以Western印迹检测CREB和TORC2的磷酸化水平；

图7为Western印迹检测PP1的蛋白表达；

图8为Western印迹检测Tubulin、总CREB(t-CREB)、磷酸化CREB(p-CREB)、TORC2/p-TORC2的蛋白表达水平；

图9为利用免疫细胞荧光技术检测细胞内TORC2的定位及表达；

图10为利用葡萄糖氧化酶法检测CREB过表达所增加的肝糖生成。

具体实施方式