[发明专利]降解水体有机磷农药残留的复合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种降解水体有机磷农药残留的复合物，其特征为：按总重量份100份计，所述复合物中包含：10-15重量份氨基多糖螯合盐、10-30重量份膨润土、5-20重量份柠檬酸、25-40重量份地衣芽孢杆菌、10-25重量份短小芽孢杆菌和10-20重量份侧孢芽孢杆菌。

2.根据权利要求1所述的降解水体有机磷农药残留的复合物，其特征为：所述氨基多糖螯合盐是由1000-3000个乙酰葡萄糖胺残基通过β(1→4)糖甙链相互连接而成的聚合物，脱乙酰度≥80％。

3.根据权利要求1所述的降解水体有机磷农药残留的复合物，其特征为：所述地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌各自独立地分离筛选自受农药污染的水体。

4.根据权利要求1所述的降解水体有机磷农药残留的复合物，其特征为：所述农药是指毒死蜱。

5.一种如权利要求1-4中任一项所述降解水体有机磷农药残留的复合物的制备方法，其特征为：包括如下步骤：

步骤1：选取按总重量份100份计，所述复合物中包含：10-15重量份氨基多糖螯合盐、10-30重量份膨润土、5-20重量份柠檬酸、25-40重量份地衣芽孢杆菌、10-25重量份短小芽孢杆菌和10-20重量份侧孢芽孢杆菌；

步骤2：所述地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌各自独立地分离筛选自受农药污染的水体；

步骤3：将所述氨基多糖螯合盐、膨润土、柠檬酸、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌混合均匀，得所述复合物。

6.根据权利要求5所述的一种降解水体有机磷农药残留的复合物的制备方法，其特征为：所述步骤2中包括分离筛选的方法进一步包括如下步骤：

步骤(1)：采集水样和沉积物，将水样和沉积物样品过滤；

步骤(2)：用含毒死蜱25mg/L的富集培养基于30℃，200rpm富集培养7天后，取10％转接至新鲜富集培养液中并将农药浓度提高一倍，再继续培养7天，如此连续转接6次，直至富集培养基中农药浓度提高到600mg/L；

步骤(3)：富集培养结束后，各取10％离心收集菌体，再分别转接到无机盐培养基，添加600mg/L的毒死蜱，相同培养条件下再分别驯化两周；

步骤(4)：在以毒死蜱为唯一碳源的无机盐培养基内连续继代培养筛选，再用平板稀释法将驯化后的菌液涂布到含有毒死蜱100mg/L的无机盐培养基平板，在降解菌筛选初期，利用菌株降解毒死蜱后在固体培养基平板上形成透明圈的大小进行降解能力的初步确定；

步骤(5)：挑取在平板上产生降解透明圈的单菌落进行划线，直至分离获得纯化的菌株；选择在含农药培养基上生长好、传代稳定且降解能力较好的菌株保存；根据细菌的菌落形态、生理生化特征对分离的菌株进行鉴定，从细菌的菌落形态和生理生化实验确定优势菌种为地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌。

7.根据权利要求6所述的降解水体有机磷农药残留的复合物的制备方法，其特征为：所述富集培养基为：蛋白胨10.0g/L，NaCl 1.0g/L，KH₂PO₄ 1.0g/L，pH 7.0。

8.根据权利要求6所述的降解水体有机磷农药残留的复合物的制备方法，其特征为：所述无机盐培养基：K₂HPO₄ 0.2g/L，KH₂PO₄ 0.5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.4g/L，FeSO₄·7H₂O0.002g/L，(NH₄)₂SO₄ 0.2g/L，CaSO₄ 0.08g/L。