[发明专利]黑色素前体物多巴醌的制备方法及应用

权利要求书

1.一种黑色素前体物多巴醌的制备方法，其特征在于：

以黧豆提取物左旋多巴为主要生色活性物质，使用土豆皮提取的酪氨酸酶在生物工艺催化反应下生成黑色素前体多巴醌。

2.根据权利要求1所述的一种黑色素前体物多巴醌的制备方法，其特征在于：

具体步骤如下：

步骤一、黧豆提取物的制备：

将藜豆粉碎，用质量分数30%乙醇与0.1%乙酸的混合液常温提取，过滤，得提取液；将提取液减压浓缩，析出结晶，静置过夜，过滤，得左旋多巴粗品；粗品溶解过滤，滤液加维生素C， 调节pH为3.5，析出结晶，静置4h，过滤；滤饼洗涤干燥，得黧豆提取物；

步骤二、酪氨酸粗酶冻干粉的制备：

马铃薯块茎过夜，清水解冻，得碎皮屑，加入聚乙烯吡略烷酮和磷酸缓冲液匀浆，过滤，缓慢加入硫酸铵粉末，离心；取上清液继续加入硫酸铵，离心；沉淀真空冷冻干燥，得到酪氨酸粗酶冻干粉；

步骤三、利用步骤一和二制得的提取物进行生物催化反应：

配置质量分数为10%黧豆提取物溶液，加入生物反应器中，将温度控制在35℃，按照黧豆提取物溶液体积的1/10的比例，加入质量分数30%酪氨酸粗酶冻干粉溶液，进行生物转化反应，定时取样检测，当300nm的吸光度大于2.0并且475nm的吸光度大于0.5时，终止生物转化反应，得到黑色素前体物粗品；

步骤四、粗品纯化：

对步骤三所得的黑色素前体物粗品进行离心去蛋白、活性炭吸附去黑色素颗粒、乙酸乙酯萃取、旋转蒸发除溶剂纯化处理，得到黑色素前体物多巴醌。

3.根据权利要求1所述的一种黑色素前体物多巴醌的制备方法，其特征在于：

步骤一中，所述静置温度为0-10℃；所述干燥温度为60-70℃。

4.如权利要求1-3所述制备方法制得的黑色素前体物多巴醌在染发方面的应用。