[发明专利]一种使用茎段进行胡颓子属植株组织培养的方法

说明书

本发明属于植物的组织培养领域，提供了一种使用茎段进行胡颓子属植株组织培养的方法，以及相应的消毒组合物、引入培养基、增殖培养基和生根培养基。所述方法包括：获得来自胡颓子属植株的带有至少一个芽苞的茎段；对所述茎段进行消毒处理，以获得无菌茎段；将所述无菌茎段置于引入培养基中进行培养，以使所述无菌茎段长出初代芽；和将初代芽置于增殖培养基中进行培养，从而获得伸长苗。本发明的胡颓子属植株组织培养方法高效、成活率高，可用于大规模的培育胡颓子属植株。

技术领域

本发明属于植物的组织培养领域，特别涉及一种使用茎段进行胡颓子属植株组织培养的方法，以及相应的消毒组合物、引入培养基、增殖培养基和生根培养基。

背景技术

沙枣(Elaeagnus angustfolia L.)是一种胡颓子属(Elaeagnus)植物，起源于北美和欧洲，天然分布于高加索和中亚区域。沙枣的叶子富含营养，可用作家畜的食物，花朵芳香可作为花蜜的来源，果实可作为替代食品，种仁含超过20％的油份，且其根系与根瘤菌共生，使其能够固定来自土壤的氮，因此沙枣被许多人认为是一种作为食物、油料来源的宝树，并且有益于生态。沙枣还是一种对环境很重要的物种，其生长迅速并且可耐受干旱、盐碱和沙埋。对于控制土地的沙漠化(例如，中国西北地区的沙漠化)，以及增加当地农民的收入，种植沙枣是理想的选择。

为了能够有效且经济地种植这一树种，关键是要提供有效的再生和繁育方法，来产生植物材料并且实现该植物材料的遗传转化以改进树种性状。

与传统的繁育方法相比，组织培养法可以用于沙枣的快速生产和种植。但是，现有的沙枣的组织培养方法存在扩培数量少、增殖率、生根率和成活率低下等缺陷，并且培养过程中会出现玻璃化等问题。因此，本领域急需一种高效、高成活率的沙枣的组织培养方法。

发明内容

本发明的目的是一种高效、高成活率的胡颓子属植株组织培养方法，以及相应的消毒组合物、引入培养基、增殖培养基和生根培养基。

在一个方面，本发明提供了一种用于胡颓子属植株的组织培养方法，所述方法包括：(a)获得来自胡颓子属植株的带有至少一个芽苞的茎段；(b)对所述茎段进行消毒处理，以获得无菌茎段；(c)将所述无菌茎段置于引入培养基中进行培养，以使所述无菌茎段长出初代芽；和(d)将初代芽置于增殖培养基中进行培养，从而获得伸长苗。在一些实施方式中，所述胡颓子属植株是沙枣。

在一些实施方式中，本发明所述方法的步骤(a)中所述的茎段来自有菌培养的胡颓子属植株。在另一些实施方式中，步骤(a)中所述的茎段是当年生茎段。在一些实施方式中，步骤(a)中所述的茎段包括来自从胡颓子属植株的顶部起前七节、前六节、前五节、前四节或前三节中的一节或多节茎段。在一些实施方式中，步骤(c)中所述的茎段长度为1-6cm、1-5cm、1-4cm或者2-3cm。在一些实施方式中，步骤(a)中所述的茎段经流水冲洗至少10分钟、20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、或者1小时。