[发明专利]一种使用叶片培养胡颓子属植株组织的方法和培养基

说明书

本发明涉及植物的组织培养领域，提供了一种使用叶片进行胡颓子属植株组织培养的方法，以及相应的再生培养基。所述方法包括：获得来自胡颓子属植株的叶片，其中所述胡颓子属植株是无菌植株；切割所述叶片，从而获得叶盘；将所述叶盘置于再生培养基上培养，从而获得再生芽。本发明作为一种高效、高成活率的胡颓子属植株的组织培养方法，可以大批量的培育胡颓子属植株。

技术领域

本发明涉及植物的组织培养领域，特别涉及一种使用叶片进行胡颓子属植株组织培养的方法，以及相应的再生培养基。

背景技术

沙枣(Elaeagnus angustfolia L.)是一种胡颓子属(Elaeagnus)植物，起源于北美和欧洲，天然分布于高加索和中亚区域。沙枣的叶子富含营养，可用作家畜的食物，花朵芳香可作为花蜜的来源，果实可作为替代食品，种仁含超过20％的油份，且其根系与根瘤菌共生，使其能够固定来自土壤的氮，因此沙枣被许多人认为是一种作为食物、油料来源的宝树，并且有益于生态。沙枣还是一种对环境很重要的物种，其生长迅速并且可耐受干旱、盐碱和沙埋。对于控制土地的沙漠化(例如，中国西北地区的沙漠化)，以及增加当地农民的收入，种植沙枣是理想的选择。

为了能够有效且经济地种植这一树种，关键是要提供有效的再生和繁育方法，来产生植物材料并且实现该植物材料的遗传转化以改进树种性状。

与传统的繁育方法相比，组织培养法可以用于沙枣的快速生产和种植。但是，现有的沙枣的组织培养方法存在扩培数量少、增殖率、生根率和成活率低下等缺陷，并且培养过程中会出现玻璃化等问题。因此，本领域急需一种高效、高成活率的沙枣的组织培养方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于胡颓子属植株组织培养的方法以及相应的再生培养基。

本申请的一方面提供了一种用于胡颓子属植株的组织培养方法，所述方法包括：(a)获得来自胡颓子属植株的叶片，其中所述胡颓子属植株是无菌植株；(b)切割所述叶片，从而获得叶盘；(c)将所述叶盘置于再生培养基上培养，从而获得再生芽。

在一些实施方式中，所述胡颓子属植株是沙枣。

在一些实施方式中，所述的叶盘的大小为0.6-1.5cm×0.6-1.5cm，优选约为1cm×1cm。

在一些实施方式中，将所述叶片从叶柄处切断。在一些实施方式中，将所述叶片从叶柄处切断后，仍与所述叶片连接的叶柄长度为约1.0mm-3.5mm、1.5mm-3.0mm、2.0mm-2.5mm或约2mm。

在一些实施方式中，进一步在所述叶片的主叶脉处进行切割。在一些实施方式中，在所述叶片的主叶脉上的一处、两处、三处或四处进行切割。

在一些实施方式中，再生培养基包括基础培养基、琼脂和至少一种植物激素。

在一些实施方式中，再生培养基中的所述的基础培养基是WPM培养基。

在一些实施方式中，再生培养基中的所述琼脂的浓度是5g/L-20g/L、8g/L-15g/L、8g/L-12g/L或6g/L-10g/L。