[发明专利]一种飞龙掌血离体培养的方法

权利要求书

1.一种飞龙掌血离体培养的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)外植体采集：采集飞龙掌血的萌蘖作为外植体；

(2)初代诱导培养：对外植体消毒后剪成茎段培养获得不定芽；

(3)继代增殖培养：对不定芽进行继代增殖培养，得不定芽丛；

(4)生根培养：对不定芽丛进行生根培养，得幼苗；

(5)移植：将试管苗进行移植，得种苗。

2.根据权利要求1所述的飞龙掌血离体培养的方法，其特征在于，所述步骤(1)中：采集飞龙掌血根茎联接处的萌蘖作为外植体；所述萌蘖为树木被砍伐后重新长出来的新芽。

3.根据权利要求1所述的飞龙掌血离体培养的方法，其特征在于，所述步骤(2)中：先使用酒精消毒，冲洗，然后再使用升汞溶液消毒并冲洗。

4.根据权利要求1所述的飞龙掌血离体培养的方法，其特征在于，所述步骤(2)中：将外植体剪成1.0-1.5cm长的茎段接种到初代诱导培养基中培养25-35天；

所述初代诱导培养基的条件为：

Miller培养基，1.0-3.0mg/L Vc，0.1-0.5mg/L PVP，0.05-0.1mg/L ZT，0.01-0.1mg/LIBA，0.1-0.5mg/L活性炭，25-30g/L蔗糖，5.0-7.0g/L琼脂，pH为5.4-5.8。

5.根据权利要求1所述的飞龙掌血离体培养的方法，其特征在于，所述步骤(3)中：将不定芽切成长1.5-2.0cm长的茎段，接种到增殖培养基中培养20-30天；

所述增殖培养基中的条件为：

Miller培养基，2.0-4.0mg/L Vc，0.1-0.5mg/L PVP，0.1-0.5mg/L ZT，0.05-0.1mg/LIBA，0.1-0.5mg/L活性炭，25-30g/L蔗糖，6.0-7.0g/L琼脂，pH为5.4-5.8。

6.根据权利要求1所述的飞龙掌血离体培养的方法，其特征在于，所述步骤(4)中：将不定芽丛切成2.0-3.0cm长的茎段，接种到生根培养基中培养20-30天；

所述生根培养基的条件为：

Miller培养基，0.1-0.5mg/L IBA，0.5-1.0mg/L GA₃，25-35g/L蔗糖，3.0-4.0g/L琼脂，pH为5.4-5.8。

7.根据权利要求1所述的飞龙掌血离体培养的方法，其特征在于，所述步骤(5)中：将试管苗转移至大棚内炼苗；然后将试管苗取出并清洗根部；在基质栽培成苗得种苗。

8.根据权利要求7所述的飞龙掌血离体培养的方法，其特征在于，所述基质中包含赤红壤和腐质土。

9.根据权利要求1-8任一所述的飞龙掌血离体培养的方法，其特征在于，在步骤(2)中，培养条件为：恒温25℃，无光培养。

10.根据权利要求9所述的飞龙掌血离体培养的方法，其特征在于，在步骤(3)和步骤(4)中，培养条件为：温度25-27℃，光照强度为2500-2800lx，光照时间为10-12小时/天，湿度60％-70％。