[发明专利]一种大鼠非肥胖非酒精性脂肪性肝病模型的建立方法

说明书

本发明公开了一种大鼠非肥胖非酒精性脂肪性肝病模型的建立方法，饲喂包含高温处理的大豆的人类饮食模拟饲料，所述的高温处理为140‑160℃干热加工12‑18min。本发明在大鼠饲料中添加高温加工的大豆，成功构建了非肥胖非酒精性脂肪性肝病模型。本发明造模方法简单，模拟了中国人的饮食模式，大鼠没有明显的肥胖或消瘦，克服了现有模型的缺陷，对人类非肥胖非酒精性脂肪肝发病机制提供研究基础。此外，本发明的模型病理表现以小泡性脂变为主，对NAFLD的诊断提供一定的借鉴意义。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种大鼠非肥胖非酒精性脂肪性肝病模型的建立方法。

背景技术

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指除外酒精和其他明确的肝损害因素所致的，以弥漫性肝细胞脂肪变为主要特征的临床病理综合征，疾病谱包括单纯性肝脂肪变、非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)、肝硬化和肝细胞癌。NAFLD现已经成为世界上最常见的慢性肝病之一，在成年人中的全球患病率约为25.24％。2018年我国NAFLD患病率为29.6％。NAFLD已超过病毒型肝炎，成为我国的第一大肝病，但是目前临床上尚缺乏用于NAFLD安全且有效的治疗药物。NAFLD不仅给个人和社会带来了严重的经济负担，而且严重危害国民健康。并非所有肥胖受试者都患有NAFLD，并且在非肥胖个体中也可以发现NAFLD。为了更好地了解非肥胖受试者中发生的NAFLD，我们建议使用术语“非肥胖非酒精性脂肪性肝病”。

迄今为止，NAFLD的发病机制尚未完全阐明，经典理论为“二次打击”学说。在高脂饮食、肥胖、胰岛素抵抗等因素的作用下，肝脏出现脂质沉积形成脂肪肝，即“一次打击”。肝脏脂肪变易于接受氧化应激等“二次打击”，导致炎症、坏死和纤维化进展。因此，过氧化损伤和炎症可能同时存在，共同推进NAFLD向终末期肝病的进展。最近，也有学者提出“多重打击”学说的理论，认为胰岛素抵抗，脂代谢紊乱，营养因素，肠道菌群以及遗传因素共同参与导致NAFLD的发生。但其中的具体机制尚未完全阐明。

近年来，国民的饮食结构发生的重大改变，人们摄入的干炒、煎炸等高温加工食品越来越多，而这类食品在加工过程中可产生大量自由基，其中活性氧(reactive oxygenspecies，ROS)可与生物膜磷脂、多不饱和脂肪酸、核酸等大分子发生过氧化反应，引起机体氧化损伤。但这类食品的危害尚未引起广泛重视，尤其是高温干炒食品对肝脏的损害目前尚未见报道。在我们前期对NAFLD的临床资料与高危因素调查问卷分析发现，部分患者BMI未达到超重或肥胖的诊断标准，而是与摄入干炒、煎炸等高温加工食品与NAFLD的发生关系密切，通过对患者进行饮食干预，减少该类食品的摄入，可缓解NAFLD病情，改善预后。

现有的NAFLD的动物模型以高脂饮食饲喂为代表，可模拟人类NASH的组织病理学特征和代谢综合征表现。但这些模型存在一些缺点例如肝脏纤维化程度较轻，强制过量喂养脂肪，不符合中国人饮食结构等。蛋氨酸和胆碱缺乏的饮食，它可以在更短的喂养时间内复制出NASH组织学表型，可以引起更严重的炎症，氧化应激，细胞凋亡和纤维化。但是，喂食MCD饮食的动物显示出显著的体重减轻(10周内高达40％)。

这些饮食模式与我们目前的饮食模式差别较大。当前社会人们对油炸食物等高温加工食物的摄入频率明显增加，尤其是年轻人。越来越多的年轻人虽然体重指数(BMI)、血脂等指标未见明显异常，但却患有脂肪肝。关于非肥胖非酒精性脂肪性肝病的研究尚不完整，其机理尚未完全阐明。

发明内容

本发明针对上述现有技术存在的不足，模拟中国人的饮食模式，提供一种大鼠非肥胖非酒精性脂肪性肝病模型的建立方法，大鼠没有明显的肥胖或消瘦，对非肥胖非酒精性脂肪肝发病机制提供研究基础，对该病的诊治具有临床意义。

具体技术方案如下：