[发明专利]一种比率型荧光传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种比率型荧光传感器，其特征在于：所述比率型荧光传感器至少包括DNA四面体纳米结构，所述DNA四面体纳米结构由四条带有荧光染料标记的单链DNA自组装形成。

2.如权利要求1所述的比率型荧光传感器，其特征在于：四条带有荧光染料标记的单链DNA分别为：

DEA标记的DNA：TCA ACT GCT CGA GGA TAA ACG ACA CTA CGT GGG AAA TAC TAT GGGTCG ACT TC-DEA(SEQ ID NO.1)；

FAM标记的DNA：FAM-TAT CCT CGA GCA GTT GAA GTG TAC AGA GCT GTA ATA ATG GGTACC TCC AAT AC(SEQ ID NO.2)；

Texas Red标记的DNA：Texas Red-CCA AAG CTT AGT CTG AAA ATT ACA GCT CTG TACACA GAA GTC GAC CCA TAG TA(SEQ ID NO.3)；

Cy5标记的DNA：TTC AGA CTA AGC TTT GGA TTC CCA CGT AGT GTC GTA GTA TTG GAGGTA CCC AT-Cy5(SEQ ID NO.4)。

3.如权利要求1或2所述的比率型荧光传感器的制备方法，其特征在于：将四条带有荧光染料标记的单链DNA混合后进行退火反应，然后进行冷却，得到比率型荧光传感器。

4.如权利要求3所述的比率型荧光传感器的制备方法，其特征在于：将四条带有荧光染料标记的单链DNA分别溶解在反应缓冲液中，将四种溶液混合后进行退火反应，然后置于冰上进行冷却得到比率型荧光传感器。

5.如权利要求3所述的比率型荧光传感器的制备方法，其特征在于：反应缓冲液为50mMKAc，20mM Tris-Ac，10mM Mg(Ac)₂，100μg/mL BSA，pH 7.9。

6.如权利要求3所述的比率型荧光传感器的制备方法，其特征在于：退火反应的温度为90-100℃，退火反应的时间为8-12min；优选的退火反应的温度为95℃，退火反应的时间为10min。

7.如权利要求3所述的比率型荧光传感器的制备方法，其特征在于：在冰上进行冷却的时间为0.5-1.5h。

8.权利要求1或2所述的比率型荧光传感器在核酸酶检测中的应用；

优选的，所述核酸酶分别为KpnI、HindIII，和XhoI的核酸酶。

9.利用权利要求1或2所述的比率型荧光传感器进行检测核酸酶的方法，其特征在于：将比率型荧光传感器与待测液进行混合，进行孵育，将产物稀释，利用荧光光谱的范围内的激发光进行荧光检测；

优选的，孵育的温度为35-40℃，孵育的时间为0.8-1.2h；优选为37℃，1h。

10.如权利要求9所述的比率型荧光传感器进行检测核酸酶的方法，其特征在于：激发光的波长为400-500nm。