[发明专利]双头三螺旋核酸探针及其检测氯霉素的方法

权利要求书

1.一种双头三螺旋核酸探针，其特征在于：它由环状探针和茎状探针按(2～4)：1的摩尔比于pH值7.5±0.5的液体环境中混合后，室温孵育形成；

环状探针由3部分组成：(a)氯霉素的核酸适配体，序列如SEQ ID NO.3所示；(b)位于氯霉素核酸适配体5’端的长19±3nt的多核苷酸，(c)位于氯霉素核酸适配体3’端的长19±3nt的多核苷酸；(b)、(c)部分所述多核苷酸全由腺嘌呤核苷酸构成，或全由胸腺嘧啶核苷酸构成；

环状探针两端分别共价键连接荧光染色基团和荧光淬灭基团；

茎状探针是长度与环状探针(b)、(c)部分长度之和相等，且与(b)、(c)部分的序列互补配对的多核苷酸。

2.如权利要求1所述的双头三螺旋核酸探针，其特征在于：所述环状探针的(b)、(c)部分长度各为19nt。

3.如权利要求1所述的双头三螺旋核酸探针，其特征在于：环状探针的序列如SEQ IDNO.1所示；茎状探针的序列如SEQ ID NO.2所示。

4.如权利要求1所述的双头三螺旋核酸探针，其特征在于：所述液体环境中，Tris-HCl的浓度为30～40mM，KCl的浓度为60～80mM，MgCl₂的浓度为8～12mM。

5.如权利要求1所述的双头三螺旋核酸探针，其特征在于：所述孵育的时间为15min；

和/或，所述pH值为7.5；

和/或，所述液体环境中，Tris-HCl浓度为36.7mM；

和/或，KCl的浓度为73.3mM；

和/或，MgCl₂的浓度为11.1mM。

6.如权利要求1～5任一所述的双头三螺旋核酸探针，其特征在于：环状探针和茎状探针的摩尔比为2:1。

7.权利要求1～6任一所述的双头三螺旋核酸探针在检测氯霉素中的用途。

8.一种检测氯霉素的方法，其特征在于，包括如下步骤： 1)将样品与权利要求1～6任一所述的双头三螺旋核酸探针混合，室温放置25～30min； 2)测荧光强度。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤1)中的放置时间为27min。

10.如权利要求8或9所述的方法，其特征在于，它还包括如下步骤： 3)将氯霉素溶液标准品与权利要求1～6任一所述的双头三螺旋核酸探针混合，室温放置25～30min，测荧光强度。